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菠蘿(Ananas comosus)，鳳梨科，鳳梨屬多年生草本果樹植物[1]，原產巴西，為熱帶多年生草本植物，16世紀時傳入中國生物論文， 有70多個品種，嶺南四大名果之一。菠蘿含有大量的果糖，葡萄糖，維生素A、B、C，磷，檸檬酸和蛋白酶等營養物質。其果味甘性溫，具有解暑止渴、消食止瀉之功，為夏令醫食兼優的時令佳果。另外，菠蘿皮中富含菠蘿酶，有豐富的藥用價值，據國外專家20多年實驗，長期食用菠蘿皮，心腦血管生物論文，糖尿病發病率顯著降低，并有一定的抗癌效果。

近年來分子生物學的發展以及各種分子標記技術不斷出現，使得植物遺傳分析研究得以迅速發展，其中以SSR標記在植物遺傳研究上應用最為廣泛。隨著測序技術成本的降低，GenBank中大量的植物EST數據為SSR分子標記的開發提供了新的途徑[2]中國學術期刊網。EST-SSR除具一般SSR分子標記特點外，還有信息量大，通用性好，開發簡單、快捷、成本低等[3]的特殊優勢。目前許多作物如西瓜[4]、蘋果[5]、香菇[6]、甘蔗[7]已開發大量的EST-SSR，并應用于遺傳作圖、遺傳多樣性[8]等研究上，但在菠蘿栽培種上至今尚未見從EST中開發SSR的相關報道。

本研究對現有菠蘿EST中SSR信息進行全面分析，以明確菠蘿EST-SSR發生頻率和特點，為進一步建立EST-SSR標記并探索其在菠蘿研究中的遺傳作圖、育種材料評價、品種鑒定等的應用奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

采集菠蘿幼嫩的葉片于-20℃保存。

1.2 菠蘿EST的獲得及EST-SSR序列查找

從美國國家生物技術中心(National Center for Biotechnology Information，NCBI)的植物基因組數據庫(ncbi.nlm.nih.gov/genomes/PLANTS/PlantList.html)共搜索到5659條菠蘿的EST序列。應用Websat（wsmartins.net/websat/）在線程序搜索EST-SSR。搜索的標準為:二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸和六核苷酸重復序列的重復次數分別大于或等于9、6、5、4和3。

1.3 EST-SSR引物設計

利用Primer Premier 3.0在線程序對包含有SSR的EST設計引物生物論文，引物設計的原則為EST序列長度大于100 bp，SSR序列的開始和結束位置分別距5'和3'端不少于20 bp。引物設計的主要參數為：引物長18~27bp，最適為22bp；引物退火溫度Tm值57~60℃，上游與下游引物的Tm值相差±1℃；PCR預期產物長100~400bp；盡量避免引物二聚體，發夾結構和錯配等。按重復類型的比例挑選30對引物由上海生物工程技術服務有限公司合成。

1.4 EST數據冗余分析

利用VecScreen(ncbi.nlm.nih.gov/VecScreen)及RepeatMasker(repeatmasker.org)去除載體污染和重復序列,對于那些能設計出引物的EST序列，最后通過Tm值和引物序列比對進一步刪除冗余序列。

1.5 DNA提取

采用改良CTAB法[9]提取菠蘿的基因組DNA中國學術期刊網。

1.6 PCR擴增、電泳檢測

PCR反應體系（25μl)：10×buffer 2.5μl，Mg2+ 25mmol/L 1.5μl， dNTP10mmol/L 0.5μl，引物100μmol/L1μl，Taq酶5.0U 0.2μl，模板DNA 20ng/μl 3μl。

反應程序為：94℃預變性5分鐘，94℃變性30秒，51℃退火40秒生物論文，72℃延伸50秒，38個循環，72℃終延伸7分鐘，8℃保存。

PCR產物用6%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳進行分離檢測，120 V電壓電泳1.5 h后，采用銀染法染色，BIO-RAD Gel Doc2000凝膠成像系統中成像。

1.7 SSR位點的功能分析

對篩選出的SSR提取其所在的基因序列，概念性翻譯成蛋白質序列后，利用Blastp比對，提取相似性最高的序列注釋信息，作為SSR靶向基因的功能注釋，并對SSR位點的注釋信息進行分類。

2 結果與分析

2.1 菠蘿EST-SSR的頻率和分布密度

在5 659條EST序列中，經過篩選共發現SSR序列636個生物論文，占整個EST數據庫的11.24%，表明菠蘿中的EST-SSR十分豐富。經計算去除冗余后的菠蘿EST序列總長約為4.7×106bp，菠蘿SSR分布密度為平均7.39 kb EST就存在一條SSR(表1)，并且不同重復類型的平均距離有明顯差異，EST-SSR出現頻率越高其平均距離則越小。菠蘿EST-SSR中含有二核苷酸、三核苷酸、四核

苷酸、五核苷酸、六核苷酸重復的序列分別占EST數據庫中發現SSR序列總數的42.61%(271/636)、29.25%(186/636)、3.46%(22/636)、4.56%(29/636)、20.13%(128/636)(表1)，說明菠蘿EST-SSR的優勢重復單元為二核苷酸、三核苷酸和六核苷酸，三者共占EST-SSR總數的91.98%。其中二核苷酸重復的出現頻率（42.92%）明顯高于其他類型，三核苷酸（28.93%）和六核苷酸（20.13%）重復的出現頻率也相對較高。重復類型為四核苷酸、五核苷酸的重復所占的比例比較小，只占總SSR的8.02%。

表 1 菠蘿中EST-SSR的數量、比例、出現頻率與平均距離

Table 1Number,Proprotion,frequency and mean distance of EST-SSR inpineapple

 

重復類型

Repeat type

SSR數量

Number of SSR

所占總SSR比例/%

Proprotion in all SSRs

出現頻率/%

Frequency

平均距離/kb

Mean distance

    二核苷酸Dinucleotide

271

42.61%

4.79%

17.34

  三核苷酸

Trinucleotide

186

29.25%

3.29%

25.27

  四核苷酸

Tetranucleotide

22

3.46%

0.39%

213.64

  五核苷酸

Pentanucleotide

29

4.56%

0.51%

162.07

  六核苷酸

Hexanucleotide

128

20.13%

2.26%

36.72

  總計Total

636

100%

篇2

自1993年6月29日我國第一家醫藥公司—哈醫藥在上海交易所上市以來，經過十多年的發展，至2009年3月我國共有醫藥上市公司100家，醫藥板塊作為朝陽產業廣受投資者關注。醫藥上市公司已成為我國醫藥行業中具有一定規模和市場競爭能力的優勢群體，成為我國醫藥產業發展的主力。其中屬于生物醫藥領域的上市公司有18家，占醫藥行業的18％，代表了目前我國生物醫藥產業利用資本市場的總體狀況。筆者將對這18家生物醫藥上市公司進行資本市場利用現狀的實證分析，以期對利用資本市場促進我國生物醫藥產業發展提供有益借鑒。

1生物醫藥產業上市公司總體發展概況

生物醫藥是一個投入相當大的產業，前期的研究開發與后期的產業化都需要雄厚的資金作為保障。生物醫藥業的發展需要資本市場為其注入資金、專業技術和人才等多種現代生產要素。生物醫藥公司上市是走向資本市場利用的有效途徑，上市后的生物醫藥公司可成為龍頭企業，擁有組織制度優勢、市場組織優勢以及資金、技術和人才等優勢。

至2008年底，我國已有18家生物醫藥概念的股份公司上市發行股票，利用資本市場直接融資，籌集到大量生物醫藥業發展資金，同樣也說明我國生物醫藥業目前對資本市場的利用主要是通過股票市場進行的。自1993年第一家生物醫藥類公司—四環生物上市以來，深、滬A股市場生物醫藥類上市公司的數量不斷增加，迅速發展到2008年的18家，流通A股從最初的9億元增長至44．08億元，增長了3．9倍。可見，生物醫藥業類公司整體籌資能力在不斷增強，生物醫藥業的投入不斷加大，有力推動了我國生物醫藥業的發展。

2生物醫藥產業上市公司資本經營情況分析

生物醫藥類企業發行上市進入證券市場，打開了通往資本市場融資的道路，為生物醫藥業的快速發展提供了資金支持。生物醫藥上市公司積極在資本市場上進行資本運營，為生物醫藥業的產業化發展創造了良好的融資環境，企業實力不斷增強，業績穩定增長，為各公司上市后實施配股或發行債券創造良好條件。適時分析該類上市公司的資本運營情況，結合企業實際、經濟發展內在要求以及資本運營的規律，發現行業發展中存在的問題，適時進行資產調整與重組，推進產業結構的優化與升級，對于該類上市公司持續利用資本市場發展生物醫藥產業具有重要意義。

2．1主營業務收入和凈利潤分析

2002－2007年，我國生物醫藥上市公司的主營業務收入總體呈穩步增長趨勢（見圖1）。2002年平均每個公司主營業務收入為3.267億元，占醫藥類上市公司平均值的31．87％；2007年平均每公司主營業務收入已達到4.291億元，占的醫藥類上市公司的26．78％，年平均增長0.205億元，年增長率為5．89％。其中，長春高新、北海國發、交大昂立、錢江生化、星湖科技、誠志股份等6家公司的年平均主營業務收入在4億元以上，收入增長幅度明顯高于行業平均水平3．842億元，年平均增長7．119億元；其余12家上市公司年平均主營業務收入低于行業平均水平，年平均增長僅2．102億元。由此可以看出，在主營業務收入方面，僅1／3左右的上市公司以較大幅度增長，而大多數上市公司的年平均主營業務收入徘徊在2億元左右。

2002－2007年，生物醫藥類上市公司的平均每公司每年凈利潤為0.149億元，占醫藥行業整體水平的23．97％，變化范圍在0.01-0.31億元之間，年際間有較大的變化幅度。北生藥業、銀廣夏、深本實、四環生物、長春高新等5個公司的平均年凈利潤為負值，萊茵生物、達安基因、交大昂立、誠志股份、四環藥業、上海萊士、天壇生物、雙鷺藥業、華蘭生物、科華生物等10個公司的平均年凈利潤為0.519億元，是生物醫藥類上市公司平均水平的3．48倍。由此可見，生物醫藥類上市公司的凈利潤年際間存在明顯波動，體現出一定的風險性特點，但超過一半以上的該類企業仍然可以獲得較大的凈利潤。

結合圖1來看，生物醫藥上市公司的主營業務收入和凈利潤在2002－2003年、2004－2007年分別是兩個逐年增長的過程。但在18家生物醫藥類上市公司中，1／3左右的公司主營業務收入和一半以上的公司凈利潤都明顯高于行業平均水平，這些公司應該屬于本行業的優勢企業。但其主營業務收入雖逐年增長，凈利潤卻依然存在年度間的大幅增減變化，說明其年際間存在明顯的成本增減變化。

2．2凈資產收益率分析

凈資產收益率反映企業自有資金投資收益水平和資本運營的綜合效益，是企業獲利能力的核心指標。該指標越高，企業自有資本獲取收益的能力越強，運營效益越好，對企業投資人和債權人權益的保證度越高。2002－2007年，生物醫藥類上市公司的凈資產收益率分別為1．41％、9．02％、8．23％、2．41％、－3．74％和3．85％，年度間有明顯差異。但誠志股份、達安基因、天壇生物、萊茵生物、華蘭生物、雙鷺藥業、科華生物、上海萊士等8個公司年平均凈資產收益率為16．83％，公司之間的差異范圍在5％-35％之間，年際變化幅度為12％－22％，屬于具有穩定凈資產收益的企業。而四環藥業、北生藥業、深本實、長春高新、四環生物、星湖科技等6個公司的年際間平均凈資產收益率為負值，屬于自有資本獲取收益能力和資本運營效益較差的公司。說明生物醫藥上市公司之間、年際之間其資本收益和資本運營效益存在差異，也是其經營風險的體現。

2．3每股收益和每股凈資產分析

每股收益反映企業普通股股東持有每一股份所能享受的企業利潤和承擔的企業虧損，是衡量上市公司獲利能力時最常用和綜合性較強的財務分析指標。每股收益越高，說明公司的獲利能力越強。2002－2007年我國生物醫藥類上市公司的平均每股收益為0．13元，年際間變化范圍在

－0．06－0．23元之間，公司間變化幅度在

－0．76－1．01元之間；其中上海萊士、雙鷺藥業、華蘭生物、科華生物、萊茵生物、達安基因、天壇生物、誠志股份、交大昂立等9個公司的每股收益高于生物醫藥業平均水平，達到平均每股收益為0．45元，公司間變化范圍在0．13－1．01元之間，年際間變化范圍在0．33－0．47之間。但深本實、北生藥業、銀廣夏、四環藥業、長春高新、四環生物等6個公司年平均每股收益為負值，星湖科技、北海國發和錢江生化等3個公司的年平均每股收益僅0．02－0．06元，遠低于平均水平。

每股凈資產是上市公司年末凈資產（即股東權益）與年末普通股總數的比值。2002-2007年生物醫藥類上市公司的6年平均每股凈資產為2．16元，年際間在1．75-2．57元／股之間波動，公司之間的差異范圍在－3．24－4．23元／股之間。除了深本實和ST銀廣夏的為負值外，其余公司的均為正值，其中雙鷺藥業、交大昂立、華蘭生物等12個上市公司的每股凈資產高于生物醫藥行業整體平均值，年際間變化幅度在2．73－4．04元／股之間，公司間差異范圍為2．31－4．23元／股之間。

通過以上分析，筆者認為，生物醫藥類上市公司在2002－2007年間利用資本市場進行資本運營，總體呈現出穩定發展的趨勢，但是生物醫藥公司之間和年際間存在明顯差異，其中50％左右的公司平均每股收益和每股凈資產均比較高，顯示出穩定的高水平發展優勢，其資本經營狀況良好。

2．4我國生物醫藥類上市公司的市場潛力分析

生物醫藥類上市公司與其他行業類上市公司比較，其股票具有更大的市場增長潛力。因為投資者投資股市除了希望獲得眼前的穩定收入外，更多的是期盼企業的高成長性和具有良好的未來發展前景。因此，具有高技術、高投入、高收益、高風險特征的生物醫藥類高新技術產業，必將是投資者投資追逐的熱點領域。

（1）生物醫藥業是典型的高新技術產業。生物技術是當前高新技術研究開發的一個熱點，生物醫藥作為生物技術開發應用的前沿之一，在生物醫藥研發領域有著廣闊的應用前景。因此，高科技與資本對接，為生物醫藥類企業提供誘人的發展空間。作為典型的高新技術產業之一，生物醫藥產業既有很高的投資收益和廣闊前景，技術創新活動又充滿風險性。但是風險往往與機遇并存，這也是風險投資的魅力所在。只不過在投入生物醫藥技術創新活動時，企業經營管理者注意采取一切可能的措施來進行風險控制即可盡可能地避免之。

（2）獲利能力與上市公司本身直接相關。從每股收益來看，2002～2007年有67％的生物醫藥上市公司具有獲利能力，50％的公司具有良好的業績，年平均每股收益達到0．45元，明顯高于醫藥行業的年平均每股收益0．23元。其余1/3的上市公司年平均每股收益為負值，盈利能力較差。說明年平均每股收益在公司之間存在顯著差異，資本運營好的公司可以獲得明顯高于醫藥行業平均水平的每股收益，對于投資選擇來說這也是風險性的一種體現。

（3）資產負債率較低，凈資產收益率較高。除深本實和銀廣夏兩個公司外，其余16家生物醫藥上市公司2006年的平均資產負債率為41．62％，明顯低于醫藥行業平均資產負債率60．83％。2002－2007年醫藥行業的年平均凈資產收益率為0．64％，而生物醫藥業為3．53％，其中近半數的上市公司更達到了16．83％。可見生物醫藥類上市公司在醫藥行業上市公司中的突出地位。

綜上所述，約30％－50％的生物醫藥類上市公司在主營業務收入、凈利潤、凈資產收益率、每股收益和每股凈資產等指標方面明顯高于該類上市公司的平均水平，屬于本行業的優勢企業，具有良好的資本運營和獲利能力；除此之外，年際間的差異也是影響生物醫藥類上市公司資本市場利用潛力的因素之一。

2．5生物醫藥上市公司的優勢分析

2003－2007年生物醫藥上市公司的年平均主營業務收入達到39572．78萬元，是非上市生物醫藥公司的7．04倍；上市公司的年平均利潤為5624．29萬元，是非上市公司的29．73倍。我國生物醫藥上市公司的平均主營業務收入和利潤都比遠比非上市公司的高，充分說明生物醫藥類企業利用資本市場的優越性。

3結語

目前我國生物醫藥上市公司積極在資本市場上進行資本運營，為生物醫藥業的產業化發展創造了良好的融資環境，企業實力不斷增強，業績穩定增長，為各公司上市后實施配股或發行債券創造良好條件。

2002－2007年，我國生物醫藥上市公司利用資本市場進行資本運營，總體呈現出穩定發展的趨勢，其中約30％－50％的生物醫藥類上市公司在主營業務收入、凈利潤、凈資產收益率、每股收益和每股凈資產等指標方面明顯高于該類上市公司的平均水平，屬于本行業的優勢企業，具有良好的資本運營和獲利能力；除開公司本身因素外，年際間的差異也是影響生物醫藥類上市公司資本市場利用潛力的因素之一。

由于生物醫藥業是典型的高新技術產業，成為投資者投資追逐的熱點領域。年平均每股收益在公司之間存在顯著差異，資本運營好的公司可以獲得明顯高于醫藥行業平均水平的每股收益。大多數生物醫藥公司的資產負債率較低，凈資產收益率較高。因此，我國的生物醫藥企業具有良好的市場潛力。我國生物醫藥上市公司的平均主營業務收入和利潤都比遠比非上市公司的高，充分說明生物醫藥類企業利用資本市場的優越性。

參考文獻

1中國證券監督管理委員會.中國證券期貨統計年鑒200……全8［M］.上海：學林出版社，2008

2國家發改委.中國高技術產業統計年鑒2008［M］.北京：中國統計出版社，2008

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1.2PCR的測線技術研究

微生物環境技術研究需要按照生物學有關內容，利用分子生物技術使微生物環境中能偶分離出一些嶄新的、有價值的研究群體或不同類型種類的生命特征。因而對微生物環境中各品種、各類別和種類的確定，可以為新微生物群體的發現提供有力的技術保障，使PCR測序技術能夠在微生物環境檢測中發揮實際應用價值。

1.3基因探針測試技術的研究

基因探針是通過對微生物環境中的特異性研究，對單鏈DNA的片段進行序列研究，在結合解鏈的相關操作步驟中，根據堿基結構生物學的互補原理，對微生物環境中提取的樣品進行相應交互反應對照觀察。在提取的微生物樣本中微生物基因探針上進行相應位置標記，可以在微生物繁殖過程中進行有效對比觀察，使微生物環境中生物技術的發展獲得有效、直觀的保障[3]。

2分子生物技術在環境工程微生物領域中的應用

2.1環境排放對微生物多樣性的影響

自然環境中存在數量眾多的生物種類，生物結構和類型存在很大不同。眾多生物的結構微小，不容易被直接觀察到，卻廣泛地生存在生物介質如河流的底泥、污水等處，這些被統稱為微生物。隨著工業的快速發展，環境污染逐漸加重，使微生物的生物學結構發生一定程度變化。在保障環境治理的同時，也要對微生物進行觀察和了解，通過與環境因素的有效結合，使微生物研究獲得有研究價值的資料。要了解環境首先要從環境的生物群上進行研究，要治理環境就要從環境工程的微生物群種中進行研究，選取相應方法技術，提供有價值的研究數據。在生活、生產中的垃圾排放要進行管理和規劃，控制垃圾排放對微生物生物結構變化產生的影響，保障微生物群的多樣性和生物學良性發展。

2.2對污染物的降解作用

現代工業的快速發展使污染物增多，嚴重地破壞了生態環境。其中有的化學物質很難被有效清除，對環境的影響有直接的破壞作用，分子生物技術是可以通過微生物對環境的影響使環境的結構產生一定變化，為污染物的降解提供新的解決途徑。中國的分子生物技術需要根據時展的客觀需要，研究微生物修復的相關機制，得到微生物改善土壤和水質的有效性方法，這種降解過程與傳統降解過程相比具有對生態環境保護和協調作用。

2.3石油降解技術應用

中國工業發展的重要特點是能源消耗速度快，社會發展離不開能源。目前環境污染治理與工業發展速度不協調，石油等能源污染問題使環境治理工作的難度加大。石油污染的類型是多種多樣的，污染可以出現在石油生產中，也可以出現在海上石油平臺，多種多樣的污染問題使污染處理困難重重。分子生物技術可以在石油降解工作發揮很大作用，分子生物技術比傳統降解技術具有多種優勢且成本相對低廉，應大力發展分子生物技術和石油降解的相關研究。

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2.對幾種鑒定小麥背景中的T1BL.1RS易位染色體的常規方法和分子標記方法進行比較發現，APAGE方法是一種快速有效的方法，最易于在小麥育種選擇中應用。

3.以來源于多小穗小麥新種質‘10-A’、普通穗型小麥品系88-1643和川育12號組配的三交組合‘10-A’/88-1643//川育12號的重組系為供試材料，選用4個RFLP標記和1個醇溶蛋白標記Gld1B3分析了T1BL.1RS易位染色體對農藝性狀和籽粒蛋白質含量、及其性狀間的簡單相關和偏相關的影響。結果表明，T1BL.1RS易位[文秘站:]染色體對小麥小穗數、每小穗結實粒數、千粒重、穗粒重、株高和籽粒蛋白質含量等幾個性狀具有顯著的影響，而對穗粒數和抽穗期的影響不大。T1BL.1RS易位系的平均小穗數、千粒重、穗粒重、株高和籽粒蛋白質含量分別比非易位系高5.0、4.6、6.4、5.7和6.8，而平均每小穗結實粒數則低6.9。從農藝性狀間的簡單相關和偏相關系數來看，一些性狀間的顯著簡單或偏相關關系僅T1BL.1RS易位系群體中檢測到，而另一些性狀間的顯著簡單或偏相關關系僅在非易位系群體間檢測到。同時，一些性狀間的簡單相關系數在易位系和非易位系群體間的差異性達到顯著或極顯著水平。這些結果表明，T1BL.1RS易位染色體不僅對小麥農藝性狀和籽粒蛋白質含量具有顯著的效應，而且對性狀間簡單相關和偏相關的程度和性質均有一定的影響。

4.利用APAGE和SDS-PAGE技術對四川白麥子地方品種、云南鐵殼麥、半野生小麥和新疆稻麥的醇溶蛋白和高分子谷蛋白亞基進行了分析。結果發現，在89份四川白麥子地方品種中，共出現35種醇溶蛋白帶型和3種高分子谷蛋白亞基組合，其中2份小麥地方品種的醇溶蛋白帶型和87份小麥地方品種的高分子谷蛋白亞基組合與‘中國春’一致。在14份云南鐵殼麥中，出現了8種醇溶蛋白帶型和3種高分子谷蛋白亞基組合。在9份半野生小麥中，出現了9種醇溶蛋白帶型和4種高分子谷蛋白亞基組合。在9份新疆稻麥中，出現9種醇溶蛋白帶型和5種高分子谷蛋白亞基，其中1份材料具有Glu-D1編碼的新亞基2.1 10.1。從醇溶蛋白和高分子谷蛋白亞基表型來看，新疆稻麥和半野生小麥的醇溶蛋白和高分子谷蛋白亞基變異最高，其次為云南鐵殼麥，而四川白麥子小麥地方品種的醇溶蛋白和高分子谷蛋白亞基變異則最低。

5.根據醇溶蛋白APAGE圖譜和高分子谷蛋白亞基SDS-PAGE圖譜，研究了四川白麥子地方品種、云南鐵殼麥、半野生小麥和新疆稻麥的Gli-1、Gli-2和Glu-1位點的等位基因變異頻率。在89份四川白麥子地方品種、14份云南鐵殼麥、9份半野生小麥和9份新疆稻麥的Gli-1位點上，分別發現14、10、14和11個等位基因；在Gli-2位點上，分別發現15、9、13和12個等位基因；而在Glu-D1位點上，則分別出現了5、5、6和8個等位基因。從等位基因出現的頻率來看，新疆稻麥和半野生小麥的等位基因變異頻率遠遠高于云南鐵殼麥和四川白麥子。從不同基因位點來看，Glu-1位點的等位變異又低于Gli-1和Gli-2位點的等位變異。

6.根據Gli-1、Gli-2和Glu-1位點的等位變異頻率計算四種小麥地方品種群體內的Nei’s遺傳變異系數。在四川白麥子、云南鐵殼麥、半野生小麥和新疆稻麥的平均Nei’s遺傳變異系數分別為0.3706、0.3798、0.5543和0.5693，表明半野生小麥和新疆稻麥的種子貯藏蛋白基因的遺傳多樣性高于四川白麥子和云南鐵殼麥。從醇溶蛋白位點和高分子谷蛋白位點的遺傳多樣性來看，這4種小麥地方品種的Gli-1和Gli-2位點的平均遺傳變異系數分別為0.5486、0.6632、0.7161和0.6770，而Glu-1位點的平均遺傳變異系數則分別為0.0148、0.1777、0.2305和0.3540，遠遠低于前者，說明醇溶蛋白位點的遺傳多樣性遠遠高于高分子谷蛋白位點的遺傳多樣性。從染色體組來看，位于B染色體組的Gli-B1、Gli-B2和Glu-B1位點的遺傳變異系數又高于A、D染色體組相應位點的遺傳變異系數，表明B染色體組的遺傳變異高于A、D染色體組。

7.利用Glu-Ax、Glu-Bx、Glu-A3、Glu-B3和Glu-1Dx5的特異性PCR引物，和位于1染色體上的γ-醇溶蛋白和低分子谷蛋白2對R標記，通過PCR的方法研究了8份四川白麥子、14份云南鐵殼麥、9份半野生小麥和9份新疆稻麥貯藏蛋白基因的遺傳多樣性。結果表明，Glu-Ax、Glu-Bx、Glu-A3和Glu-B3等4個位點的遺傳多樣性較低，而γ-醇溶蛋白和低分子谷蛋白2個R位點的遺傳多樣性較高。所有40份供試材料均未擴增出Glu-1Dx5基因的特異DN段，說明這些小麥地方品種不含5亞基的編碼基因。

8.利用14個STS-PCR的28種引物-酶組合和24個R標記對四川白麥子、云南鐵殼麥、半野生小麥和新疆稻等4種中國特有小麥地方品種群體間和群體內的遺傳多樣性進行了研究。在供試的40份材料中，11對STS-PCR引物（78.6）的16種引物-酶組合（57.1）能揭示材料間的遺傳多樣性。在28種STS引物-酶組合中，共獲得121條擴增DN段，其中32.7的片段具有多態性。在24個R位點上，21個位點（87.5 ）能夠揭示材料間的多態性。在40份材料中，共檢測到83個R等位變異，平均每個位點為3.46個等位變異。

9.根據STS-PCR和R標記的多態性，計算了材料間的Nei’s遺傳相似系數，并采用UPGMA方法對其進行遺傳聚類。結果發現，STS-PCR和R標記揭示的4種特有小麥地方品種群體內的遺傳相似性均一致地表明四川白麥子和云南鐵殼麥的群體內遺傳相似性較高，而半野生小麥和新疆稻麥群體內的遺傳相似性較低。這說明新疆稻麥和半野生小麥群體內的遺傳多樣性較高，而四川白麥子和云南鐵殼麥群體內的遺傳多樣性較低。同時，STS-PCR和R標記均能將所有40份材料相互區分開。從4種小麥地方品種間的遺傳關系來看，新疆稻麥與其它3種小麥地方品種間遺傳分化較大，單獨聚為1類；而四川白麥子和云南鐵殼麥間的遺傳關系較近，但部分半野生小麥也與云南鐵殼麥間具有較近的遺傳關系。從R標記和STS-PCR標記揭示的群體間和群體內遺傳相似系數的大小來看，與STS-PCR標記相比，R標記在材料間的多態性更高，能夠揭示更多的遺傳差異。

10.在本研究中，從種子貯藏蛋白來看，‘中國春’與‘成都光頭’的醇溶蛋白帶型和高分子谷蛋白亞基組合完全一致。從STS-PCR和R標記揭示的遺傳關系來看，‘中國春’與‘成都光頭’間的遺傳相似性最高。這些結果進一步證實‘中國春’是‘成都光頭’的一個選系。

11.利用R標記對來源于貴州、云南和四川的8份高抗赤霉病小麥地方品種和4份高感赤霉病小麥材料間的遺傳多樣性進行了研究。在小麥21條染色體的25個R位點上，共檢測到74個等位變異，平均2.96個；其中21個位點（84）能夠揭示材料間的多態性。根據R標記揭示的遺傳相似性來看，雖然高抗赤霉病小麥地方品種間以及它們與高感材料‘中國春’間的遺傳相似性較高、遺傳多樣性低，但是它們與高感赤霉病的人工合成雙二倍體‘R’和意大利小麥品種‘阿勃’間具有相當高的遺傳多樣性。這些結果表明，可利用高抗赤霉病的小麥地方品種與高感赤霉病的人工合成雙二倍體‘R’或意大利小麥品種‘阿勃’之間雜交，構建分子標記遺傳分析群體，以標記其中的抗赤霉病基因。

關鍵詞：小麥，黑麥，地方品種，赤霉病，多小穗，農藝性狀，蛋白質，遺傳多樣性，APAGE，SDS-PAGE，FISH，RFLP，STS-PCR，R

TheMolecularBiologyofSomeecialWheatGermplasms

Atract

Wheat(TriticumasetivumL.)isoneofthemostimportantcroinworld.Astheothercrop,thegeneticdiversityofcultivatedwheathasbeengreatlyerodedbythefrequentuseofsameparentalgenotypesforbreedingcultivars.Geneticerosionnotonlylimitsthefurtherimprovementofyieldandqualitybutalsomakeswheatincreasinglyvulnerabletobiologicalandenvironmentalstre.Althoughtherearemanygoodgenesfortheimprovementofwheatintherelatedwildecies,theintroductionofthesegenesfromwildicestocultivatedwheatneedsomeecialcytogeneticmanipulatio.Themoderncultivarsandlandracesaretheprimarygenepoolofcultivatedwheat.Therealsohadmanygoodgenesforwheatimprovementintheprimarygenepool,andnoecialcytogeneticmanipulationwasnecearytotrafergenesfromtheprimarygenepooltocultivatedwheat.Thus,itisanimportantworktoevaluatethegeneticdiversityoftheseresources.Themolecularbiologytechniquesmakeitispoibletoevaluatethegeneticdiversityamongthewheatgermplsmsindetail.Theobjectivesofthisstudyweretodetecttheryechromatininthebackgroundofanewmultiikeletwheatgermplasm10-Aandtheeffectsofthisryechromatinontheperformanceofagronomiccharacters,todescribethegeneticvariatioofseedstorageproteingenesintheChineseendemicwheatlandraces,toevaluatethegeneticdiversityandgeneticrelatiohiamongtheChineseendemicwheatlandraces,andtoinvestigatethegeneticdiversityamongsomeChineselandraceshighlyresistanttoheadscabbyusingAPAGE,SDS-PAGE,FISH,RFLP,STS-PCRandRmarkers.Themainresultsweredescribedasfollowings:

1.UsingAPAGE,FISH,PCRandRFLPmarkers,theryechromatininthebackgroundofanewmultiikeletwheatgermplasm10-Awasdetected.APAGEanalysisindicatedthatthe10-ApoeedthegliadinmarkersGld1B3of1RS.PCRanalysisindicatedthatthe10-Aalsopoeedthe1RSofrye.UsingfluorescencelabeledtotalgenomicDNAofryeasprobesandcommonwheatgenomicDNAofChineseringforblocking,insituhybridizationshowedthatthe1RSofryewastraferredtomultisikeletwheatline10-A.Therestrictionfragmentslocatedontheshortarmofchromosome1Bweremiingandtherestrictionfragmentsof1RSwerepresentwhentheprobes,whichhavebeenidentifiedontheshortarmofthehomologousgroup1,wereusedinRFLPanalysis.FISHandRFLPanalysisindicatedthe10-Adidnotpoethe4A-4Rwheat-ryetralocationchromosome.Theseresultssuggestedthatthemultiikeletwheatline10-AcarriedtheT1BL.1RSwheat-ryetralocationchromosome.Inthisstudy,somerecombinantswithmultiikeletderivedfromatriplecro,10-A/88-1643//Chuanyu12,werealsodetected.AllofthemalsopoetheT1Bl.1RStralocationchromosome.

2.AcomparisonofsomenormalandmolecularmethodsforidentifyingandsurveyingthepresenceofT1BL.1RStralocationinwheatwasconducted.TheresultindicatedthatAPAGEistheeasiestan doftenfasterforscreeningpurposesinwheatbreeding.

3.TheeffectsofT1BL.1RStralocationchromosomeontheperformanceofagronomiccharacters,thegrainproteincontent,andthesimpleandpartialcorrelationcoefficientsamongcharacterswereinvestigatedwith4RFLPmarkersand1gliadinlocusGld1B3inrecombinantsderivedfromatriplecro,10-A/88-1643//Chanyu12.TheT1BL.1RStralocationchromosomehadsignificenteffectsonikeletnumberperike,graiperikelet,1000-grainweight,graiweightperike,plantheightandgrainproteincontent,whilenosignificenteffectsongraiperikeandheadingdatewasdetected.TheT1BL.1RStralocationlinesresultedin5.0,4.6,6.4,5.7and6.8increaseinikeletnumber,1000-grainweight,graiweightperike,plantheightandgrainproteincontentthanthenon-T1BL.1RStralocationlines,reectively.AndtheT1BL.1RStralocationlinesresultedina6.9decreaseingraiperikeletthan1Bgenotypes.SomesignificentsimpleandpartialcorrelationcoefficientswereonlydetectedwithintheT1BL.1RStralocationgrou,whilesomesignificentrelatiohiwereonlydetectedwithinthenon-T1BL.1RStralocationgrou.AndthesignificantdifferencesofsomesimplecoefficientsweredetectedbetweentheT1BL.1RSand1Bclaes.TheseresultssuggestedthattheT1BL.1RStralocationchromosomenotonlyhadeffectsontheperformanceofagronomiccharactersandgrainproteincontentbutalsohadimpactonthesimpleandpartialcorrelationcoefficientsamongcharacters.

4.UsingAPAGEandSDS-PAGEmethods,thegliadinandHMW-gluteninsubunitsvariatiowereevaluatedinSichuanWhiteWheat,YuanHulledWheat,TibetanWeedraceandXinjiangRiceWheat.In89landracesofSichuanWhiteWheat,atotalof35gliadinpatterand3HMW-gluteninsubunitscombinatiowerefounded.Intheselandraces,2landraceshadidenticalgliadinpartternwith’Chinesering’,and87outof89landraceshadthesameHMW-gluteninsubunitscombinationwith’Chinesering’.In14acceioofYuanHulledWheat,8gliadinpatterand3HMW-gluteninsubunitscombinatiowereaeared.In9acceioofTibetanWeedrace,eachacceionhaduniquegliadinpattern,and4HMW-gluteninsubunitscombinatiowerefoundedintheseacceio.Atotalof9gliadinpatterand5HMW-gluteninsubunitscombinatioweredetectedin9XinjiangRiceWheat.TheseresultsindicatedthatmoregliadinandHMW-gluteninvariatiopresentedinTibatanWeedraceandXinjiangRiceWheatthanSichuanWhiteWheatandYuanHulledWheat.

5.TheallelicvariatioatGli-1,Gli-2andGlu-1lociin89SichuanWhiteWheatlandraces,14YuanHulledWheatacceio,9TibetanWeedraceand9XinjiangRiceWheatacceiowerestudiedbasedontheAPAGEandSDS-PAGEpatter.Therewere14,10,14and11allelesatGli-1inSichuanWhiteWheat,YuanHulledWheat,TibetanWeedraceandXinjiangRiceWheat,reectively.Intotal,15,9,13and12alleleswereidentifiedatGli-2inabovegrou,reectively.Only5,5,6and8alleleswerecharacterizedatGlu-1inabovegrou,reectively.Fromthefrequencyofaparticularalleleateachlocus,itindicatedthatmoreallelicvariatiopresentedinTibatanWeedraceandXinjiangRiceWheatthanSichuanWhiteWheatandYuanHulledWheat.AndtheallelicvariatioatGlu-1werelowerthanGli-1andGli-2.

6.BasedontheallelicvariatioatGli-1,Gli-2andGlu-1loci,thegeneticdiversityateachlociwasinvestigatedinSichuanWhiteWheat,YuanHulledWheat,TibetanWeedraceandXinjiangRiceWheat.TheNei’sgeneticvariationindexes(H)amongabove4grouwere0.3706,0.3798,0.5543and0.5693,reectively.ItindicatedthatthegeneticdiversityofstorageproteingenesamongTibatanWeedraceandXinjiangRiceWheatwerehigherthanthatofSichuanWhiteWheatandYuanHulledWheat.AtGli(Gli-1andGli-2)loci,theNei’sgeneticvariationindexes(H)amongabovegrouwere0.5486,0.6632,0.7161and0.6770,reectively.ButatGlu-1loci,theNei’sgeneticvariationindexes(H)were0.0148,0.1777,0.2305and0.3540,reectively.AndtheNei’sgeneticvariationindexes(H)atGli-B1,Gli-B2andGlu-B1locilocatedonB-genomewerehigherthanthoseofrelativelocionA-and D-genomes.TheseresultssuggestedthatthegeneticdiversityatGliwashigherthanthatofGlu-1,andthegeneticdiversityofstorageproteingenesonB-genomewashigherthanthatofA-andD-genomes.

7.FiveecialPCRprimersforGlu-Ax,Glu-Bx,Glu-A3,Glu-B3andGlu-1Dx5,and2Rprimersforγ-gliadinandLMW-gluteninwereusedtoinvestigatedthestorageproteingenevariatioamong8SichuanWhiteWheatlandraces,14YuanHulledWheatacceio,9TibetanWeedraceand9XinjiangRiceWheatacceio.ThePCRanalysisindicatedthatlowlevelgeneticdiversitywerefoundatGlu-Ax,Glu-Bx,Glu-A3andGlu-B3,whilehighlevelgeneticdiversitywerefoundedattheRlociofγ-gliadinandLMW-glutenin.TheecialDNAfragmentofGlu-1Dx5wasnotdetectedamongall40acceio.Itindicatedthattheredidnothavesubunit5encodedbyGlu-D1intheseacceio.

8.Using28primerset-enzymecombinatioof14STS-PCRmarkersand24Rmarkers,thegeneticvariatioamongSichuanWhiteWheat,YuanHulledWheat,TibetanWeedraceandXinjiangRiceWheatwereinvestigated.Elevenoutof14STS-PCRprimersets(78.6)and16outof28primerset-enzymecombinatio(57.1)werepolymorphic,producingatotalof121fragmentswithanaverageof4.3fragmentsperprimerset-enzymecombinatio.At24Rloci,21Rloci(87.5)werepolymorphic,detectingatotalof83alleleswithanaverageof3.5allelesperRloci.

篇5

兩次森林資源二類調查結果顯示，儀征市森林覆蓋率已由1987年的8.5%上升到2008年的18.26%。本文擬從各類林地、林木蓄積量、齡組、樹種結構等4個方面進行比較研究，在宏觀上把握全市森林資源現狀以及動態變化，為全市制定和調整林業建設的方針政策提供依據。

1　各類林地變化

2008年與1987年兩期二類調查相比，林業用地面積增加了11302.70hm2，增長了344.38%；有林地面積增加了9109.20 hm2，增長了401.52%；疏林地面積減少了81.80 hm2，減少了100.00%；灌木林地面積增加了1322.68 hm2，增長了7721.42%；未成林造林地面積增加了1229.98 hm2，增長了892.58%；苗圃地面積增加了68.86 hm2，增長了85.65%；宜林地面積減少了346.22 hm2，減少了49.73%，詳見表1。

表1各地類面積變化情況 單位：hm2

 

時間

有林地 疏林地 灌木林地 未成林造林地 苗圃地 無林地

1987

2008

±

篇6

一、影響因子的概念及意義

期刊影響因子（Impact Factor，IF）是1972年由美國SCI創始人加菲爾德（Garfield E）率先提出的，現已成為國際上通行的一個期刊評價指標。

影響因子是利用引文分析法評價科技期刊最基本最常用的方法，它是以期刊為對象，統計一定時域內（通常為兩年）期刊論文的平均被引率，其公式為：影響因子= 指該刊前兩年在統計當年被引用的總次數／該刊前兩年總數。是指該刊前兩年在統計當年被引用的總次數占該刊前兩年總數的比例，是用來描述期刊被引用情況的計量指標，或者是用來描述期刊影響力的指標，是用論文的平均被引率反映期刊近期在科學發展和文獻交流中所起作用的指標，可測度當年期刊的學術影響力，是衡量一個學術刊物地位的主要因素，對核心期刊的遴選起著重要作用，已成為科技期刊評價最重要的指標。影響因子越大，表明該刊所載論文被引用次數越多，從而說明該刊所載論文的影響力較大和水平較高，因而該刊的質量也高。

國際著名的科學計量學專家普賴斯經過大量的文獻統計后得出結論認為，科學后的兩年是論文被引用的高峰期。因此，目前國際上比較通行的做法是將計算影響因子的引文年度規定為兩年，依據影響因子的計算公式，其主要受三大基本要素的影響：時間、載文量、被引頻次。美國科技信息研究所（Institute of Scientific Information，ISI）對使用影響因子非常謹慎地說明，盡管影響因子是評估期刊的非常實用的工具，但在使用時（主要針對學術評價）應該慎重，必須考慮到期刊類型的不同、學科之間的差別、文獻款目類型差別、自我引用的頻率、期刊是否被收錄、期刊名稱是否有過變更等諸多因素的影響。因此，期刊的IF值受多種因素影響，在用它評價期刊質量和論文水平時，必須分析其影響因素，充分考慮它的局限性。

二、重點學科期刊影響因子的影響因素分析

（一）館藏重點學科期刊影響因子情況

什么是重點學科?教育部將其定義為“應承擔教學、科研雙重任務，要逐步做到能夠自主地、持續地培養和國際水平大體相當的博士、碩士、學士；能夠接受國內外學術骨干人員進行深造；能夠為國家重大決策提供科學依據，為開拓新的學科領域、促進學科發展作出較大的貢獻”。

我校經教育部（教研函[2007] 4號）審核批準的國家8個重點學科是：作物學一級學科（含作物遺傳育種和作物栽培與耕作學兩個二級學科）和微生物學、生物化學與分子生物學、果樹學、動物遺傳育種與繁殖、水產養殖、農業經濟管理等六個二級學科。國家重點學科是國家根據發展戰略與重大需求，擇優確定并重點建設的培養創新人才、開展科學研究的重要基地，在高等教育學科體系中居于骨干和引領地位。一級學科國家重點學科的認定在中國尚屬首次。一級學科國家重點學科的建設，將突出綜合優勢和整體水平，促進學科交叉、融合和新興學科的生長。

（二） 影響“影響因子”的主要因素

1.有學科差異的影響。期刊影響因子的大小與期刊所屬的學科領域有顯著的相關性。不同的學科有不同的發展歷程、不同的成熟程度和不同的研究方法。一個正在發展的學科和一個古老成熟的學科。一個理論研究型學科和一個應用研究型學科在引用動機和引用規范上有很大差異，一個大學科（有眾多研究者或熱門研究領域）和一個小學科在引用程度上也有較大差異，相同或相近研究領域的論文傾向于互相引證，影響因子值的差異當然也很大；各學科在研究規模、研究水平、研究方式、合作程度、引文行為都有自己的特點，這些特點決定了各學科在引文頻次水平上的差異；同時，不同學科由于發展速度和成熟程度不同，期刊數量差異很大，從而使收錄的不同學科的期刊數目差別很大。

由于學科（領域）自身的特點以及發展規律和發展階段等差別，不同研究領域的文章被引頻次是不同的，從而導致不同領域期刊的影響因子缺乏可比性。從表1、表2可以看出，農業經濟管理類期刊的影響因子高于其他學科刊物，農業經濟管理學科在中刊查閱利用率、中外文期刊復印利用率和平均影響因子方面基本上都是最高的，作物學學科排第二，其中果樹類期刊最低。同樣是學科影響因子排名前十 位的，值卻有明顯區別，某一學科最好期刊的IF值可能比另一學科最差期刊的IF值還低。這主要與學科的發展動態、歷史以及引證習慣等因素有關。所以，影響因子的大小與期刊所屬學科的性質和論文內容所涉及的研究領域的大小有關，同時也與期刊的歷史長短、知名度大小有關，還和其內容是否為當前的研究熱點有關。

2.有發表時滯的影響。期刊被引頻次中兩年的時間限制可導致不同刊物論文的被引次數有較大差異。對于出版時滯較短的刊物更容易獲得較高的影響因子，因為最先發表或公布的成果最容易或有可能引起較大的影響而被引證，相當一部分引文就因為文獻老化（超過兩年）的原因而不能被統計參與影響因子的計算；再者，不同學科論文的引證行為有所不同。這是因為不同研究領域或研究主題的成果在完善或驗證過程中經歷的時間段可能很不相同，如對于分子生物學方面具有創新研究的論文來說，則可能很快引起較大的影響并被引證，因此有研究證明，中國不同學科、不同類型的學術期刊的被引高峰期存在明顯差異。

出版時滯較短的刊物容易獲得較高的被引頻次，所以縮短刊期，可以提高被引頻次，進而提高影響因子，刊期的縮短更加吸引讀者的注意力，從而有利于期刊論文更快更多的被引用。科學技術新理論、新方法、新成果、新知識不斷涌現，這種現狀必然要求期刊縮短刊期。縮短刊期，減少出版時滯，可使刊載的信息盡快地傳遞給讀者，從而為文章的及時被引創造條件。以《安徽農業科學》、《中國農學通報》、《江西農業學報》為例，這三種期刊在不斷縮短出版周期后，被引頻次和影響因子也穩步提高。

然而，如果評價一項科研成就或一位科學家的貢獻，就更不能只看那個期刊兩年里的影響有多大了。最優秀的科學成就都不是以一時影響面廣，而是以影響的深遠取勝。比如，1905年，愛因斯坦提出的相對論，一百多年后還在廣為傳播；20世紀40年代，物理學家黃昆提出的缺陷導致x光散射的理論，六十多年后也仍然被同行所引用。這些具有開拓性的成就有一個共同特點，影響的持續年限很長很長。

3.有期刊類型的影響。期刊的辦刊方針不同，期刊類型有所不同。自然科學類期刊大致可分為學術類期刊、技術類期刊、研究進展類期刊和科普類期刊四類。學術類期刊主要刊發綜述論文和研究論文，技術類期刊主要刊發技術應用論文。即使在同一學科領域，論文類型也會不同，有的為基礎研究論文，有的是應用研究論文，因而形成了多樣的期刊類型。文章簡短且出版周期短的期刊通常有一個較高的快引指數，對于評述、綜述類期刊，快引指數相對來說是非常低的，要在出版后許多年才會達到被引用高峰。綜述類期刊的絕對被引數非常高，其平均影響因子往往超過其他類型的期刊。自然科學學術期刊評價指標體系研究課題組經大量統計分析發現：中國不同學科、不同類型的學術期刊其被引高峰期有明顯差異，一般理論性較強的基礎研究三年后才出現引文高峰期，如數學期刊被引高峰期大于兩年的占62％，被引半衰期較長；而應用研究論文因知識更新快，一般引文高峰期為兩年，被引半衰期短。這樣兩年影響因子，應用研究類期刊明顯占優勢，像生命科學期刊的平均IF值在2．5左右，而數學期刊的IF值卻在1．0左右。《中國農村經濟》IF值2．743與《中國南方果樹》IF值0.159相差甚遠。因此，每一類期刊由于各自發表的論文類別不同，引用率和引用習慣各不相同，導致每類期刊間的影響因子差別較大。在比較影響因子時，必須考慮到期刊及其所刊載文章類型的不同。

另外，專業期刊、交叉學科期刊和綜合性期刊IF值的差異，限于某專業為主引用的期刊，根本不可能被數十種或數百種期刊所引用，交叉性、綜合性期刊的性質決定了它們會被廣泛引用。

4.有統計差異的影響。不同的源期刊庫對載文量的統計不同，有的將全部文章視為載文量，有的僅將綜述、研究論文算作載文量。一方面在IF的計算中，被引用總次數(分子)統計了相應期刊中所有論文被引用的總次數，而總數(分母)則只統計論文、綜述類欄目的文章數，對評論、來信、簡訊和其他一些常被引證的欄目的文章則不進行統計，實際上，這些未被統計部分的被引用頻次對IF值的貢獻很大，影響了IF值的準確性。其次，對于一些科普類、工程技術類等期刊，根據不同期刊的不同辦刊宗旨和服務對象，這些期刊的被引用次數可能不高，但是他們的實用技術被廣泛采用，在生產中產生很好的經濟效益。可見，期刊的被引率并不完全等于利用率。再者，在自然科學類期刊中，學術類綜述性文章多由相關專業資深專家寫作，具有權威性，且多數十次上百次地引用文獻，包括自引，這就自然增加了引用的次數；另一方面，作者從事課題研究時，往往是從閱讀綜述性文章開始的，學術論文引言部分也常引用綜述性文章，這無疑大大增加了這類文章的被引頻次。加菲爾德給出1945―1988年43年間的100篇高引論文，第l篇被引187 654次，第100篇被引3 204次，這些被稱之為熱門論文的高引率提高了來源期刊的影響因子值。同一刊物中不同論文被引頻次的差異源來一是論文類型的差異，二是論文性質的差異，三是論文所涉及研究領域的差異，這種差異一方面表現為快速發展的或較新研究領域的論文比相對較成熟研究領域的論文的被引頻次高，另一方面表現為不同研究領域間的相互引證并不等價。

5.有源數據庫的影響。由于大多數數據庫對所收集的期刊進行數據采集和評價，因此其來源期刊的數量也是有限的。在有限的來源期刊中，很有可能由于學科發展的不平衡帶來來源期刊學科、語種分布的不平衡，這就造成了該數據庫在影響因子統計上的失均衡和全面。如SCIE目前只收錄了約7 000種期刊，而全世界總期刊數達210 000種，其中只有3．8％的期刊被其收錄。IF反映的是一種期刊在源期刊庫范圍內的影響，不同的期刊庫有不同的源期刊。所以，源期刊庫是對IF值起決定性的一個因素。現在的大型引文數據庫收錄期刊的學科、出版地、語種等是非均衡的，很難全面公正地反映不同國家、不同學科、不同語種和不同規模期刊的情況。例如SCI收錄各國的期刊數極不平衡，一般情況下，作者總是喜歡引用自己最容易得到的最熟悉的語種的文獻。由于SCI收錄中國期刊量小，所以國外作者對中國期刊的引用就少，而同國科學家之間因研究成果傳播的快捷性、研究主題的相關性等因素而傾向于互引，如美國科學家之間的相互引證可提高美國論文被引證頻次的30％。另外，研究表明，同語種刊物的相互引證概率較大，由于SCI更傾向于收錄英文期刊，這就使得其他語種期刊在SC1中的影響因子相對較低。

對某一特定期刊而言，由于其所在的期刊庫收錄的期刊構成不同，因而統計的IF值有較大的差異，由于源期刊庫的數量及側重點不同，同一期刊的被引頻次在不同的引證報告中會有所不同，進而導致計算出的影響因子也有差異。依據《2008 年版中國科技期刊引證報告（核心版）》、《2008年版中國期刊引證報告（擴刊版）》、和2008年版《中國學術期刊綜合引證報告》統計數據，《中國農業科學》總被引頻次依次為4 746 、5 941、6 014，影響因子依次為1．519、1.871、1.889，差異較大。這是由于這三個庫收錄的來源期刊不同所造成的。筆者認為，在討論刊物的影響因子時要考慮統計來源庫是否具有真實的代表性。

6.有引用行為的影響。在影響因子對中國期刊的評價發揮越來越大作用的同時，也出現了自引對相應刊物影響因子的貢獻過度的問題。自引主要有作者自引和期刊自引。有的期刊工作者為了使自己的期刊盡快提高引用頻次和影響因子，通過各種途徑要求或示意作者增加對該刊的引證量。在世界其他國家也有些期刊以各種不同的方式要求作者盡量引用本刊文章的情況，其目的顯然是為提高自己期刊的被引率，一旦此刊排在前列，往往可以收到廣告性效果。自引可以增加被引頻次，進而提高影響因子。正常的自引體現了研究的繼承性，但是過度的、不切實際的自引，即便不是“ 人為” 結果，也至少反映了期刊的封閉性和排他性。一般自然狀態下學術類刊物自引率不會高于20％，過度自引是不良行為，但又不肯放棄這一“廣告”手段。同時，一些組織或部門對期刊績效的評價時過分地強調影響因子指標的評價作用，對過度自引起了推波助瀾的作用。

由于引用行為及引用動機復雜多樣，存在偽引（未用而引）、漏引（用而不引）、錯引（尤其是期刊名縮寫錯誤）、集中標引、過度自引、負面引用、中性引用等一些不規范的引用行為，在某種程度上造成不正確的引文統計結果，從而使學術期刊的影響因子失真。

參考文獻：

[1]李煒.淺談期刊影響因子[J].科技情報開發與經濟，2008，(30).