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2SELEX技術的發展
目前SELEX技術出現了一些新的篩選方法，越來越多的與各種標靶相對應的適配體被篩選出來。如毛細管電泳法、硝酸纖維素膜過濾法、磁珠分離法、親和色譜法、Non-SELEX技術、無引物PCR-SELEX技術、微流體SELEX技術、生物芯片SELEX技術、原子力顯微鏡等各種新的模式也被應用到適配體的篩選中。同時還出現了SELEX技術與定量PCR，SEL-EX技術與流式細胞儀、SELEX技術與ELISA的聯合應用，更是極大的提升了篩選的效率和準確性。
2．1消減SELEX技術消減SELEX技術是一種經過改良的SELEX技術。以完整細胞為靶標的消減SELEX技術，是在篩選過程中以完整的細胞作為靶標，并消減掉能與已知或未知的共有靶標結合的配體，經過消減后的次級隨機文庫再投入到特異靶標的篩選中。它的意義在于可以實現從兩組高度同源的完整細胞中，篩選出針對其中一種細胞的特異性適配體。這項技術可應用于發現新的腫瘤細胞識別結構，還可進一步作為“生物導彈”，獨立完成靶向治療或攜帶藥物，未來將會在腫瘤的治療中發揮巨大的功效。
2．2自動化SELEX技術傳統的SELEX技術過程需要完成一套重復繁瑣的操作，使得篩選相對耗時耗力。自動化SELEX技術的建立可以簡化篩選過程，節約時間和物品的消耗，實現高通量和限定范圍，達到同時篩選多個靶分子的效果。自動化SELEX技術離不開現代分離儀器的配合，后者的發展推動了前者的進步。2001年Cox等使用Biomek2000自動化工作站成功篩選到了溶菌酶的特異性適配體，通過這種自動化篩選平臺，不到2d就完成了12輪的篩選。
2．3導向SELEX技術適配體的特異性是整個SELEX技術的核心所在，為了提高適配體的特異性和穩定性，可將已知的能與靶標非特異結合的分子摻入到文庫中或預先與靶標進行混合后再篩選，這樣可獲得只與靶標特異結合的適配體。2002年Hamm等將此技術與抗個體基因型的方法聯合運用，成功獲得了特定激酶抑制劑的特異性RNA適配體。Martell運用特殊的導向SELEX技術，從隨機表達盒雜交文庫中篩選到了能與E2F蛋白具有高親和性的RNA適配體。
3SELEX技術在醫學中的應用
3．1SELEX技術在基礎醫學研究中的應用依據核酸適配體具有與靶物質高特異性結合的能力，可以幫助我們尋找到疾病的發病機制。Roulet等提出把SELEX技術同基因表達串行分析手段聯合應用，并通過自動化的序列提取工藝，建立轉錄因子結合位點的定位模型。通過對轉錄因子適配體文庫中的某一序列進行測序，可了解該蛋白結合位點的特異性，探尋一些以前在基因組中從未研究過的結合位點，掌握在不同的核苷酸位點上非獨立堿基出現的先后順序，為闡明其結合機制提供一些線索。Bian-chi等采取SELEX技術發現，TRF1二聚體在端粒上有兩個相同的識別半位點，它們的距離可以變化，且兩個半位點的順序方向沒有區別。這為探索端粒長度的調節機制提供了新依據。
3．2SELEX技術在疾病診斷中的應用腫瘤細胞及其標志物的早期檢測對于腫瘤的診斷及預后極為重要，目前已經篩選出多種腫瘤的特異性適配體，例如急性髓系白血病的適配體KH1C12、急性淋巴細胞白血病的適配體sgc8/sgc3/sgd3、惡性膠質瘤的適配體GBI-10、Burrkitt淋巴瘤的適配體TD05、非小細胞肺癌的適配體S1/S11e/S15、小細胞肺癌的適配體HCA12/HCC03/HCH07/HCH01、乳腺癌的適配體KMF2-1a、結腸癌的適配體KDED2/KD-ED7/KDED9/KC2D3、小鼠肝癌的適配體TLS9a/TLS11a、卵巢癌的適配體DOV3/DOV4/DOV6。它們可以特異地識別腫瘤細胞，僅需少量腫瘤細胞即可實現準確的鑒別和分型。將適配體與納米顆粒結合后通過比色檢測，觀察顏色的變化即可判斷有無靶標細胞。這個實驗非常敏感，樣本中的靶細胞數超過百個即可檢測出來，還不需要昂貴的檢測設備和待檢靶標的標記與修飾。因此，有可能成為常規篩查活體標本中新生腫瘤細胞的一種新方案。與此同時腫瘤細胞的分子成像技術也已經問世，它能夠從細胞水平對生物過程進行可視化描述及測量，不僅能定位病灶，觀察某些影響腫瘤細胞行為的生物過程，還能觀察腫瘤細胞對藥物的反應。Kim等研究將前列腺特異性膜抗原(PSMA)的特異性適配體與金納米材料結合后，帶有PSMA的前列腺癌細胞便能夠被特異性地標記出來，將其作為造影劑應用在前列腺腫瘤的影像學診斷中，比傳統的造影劑顯像時間更持久，毒副作用更小，應用價值更顯著。SELEX技術還在血液的生化檢查方面，顯示出一定的應用前景。用其檢測血液中的某些靶分子，將比傳統方法更特異和高效。腦尿鈉肽(BNP)常被臨床上用來評價急性心力衰竭或急性呼吸窘迫癥患者的病情和預后。Lin等采用SELEX技術的原理，篩選到了能與BNP特異結合的適配體。在微流體試驗模式下，被熒光標記的適配體可以快速測出血液中BNP的濃度，比放射免疫分析法或是免疫分析技術更精確、更經濟。C反應蛋白(CRP)是機體在應激狀態下生成的一種非特異性的急性時相反應蛋白，CRP與冠狀動脈粥樣硬化、心肌梗死等心血管疾病具相關性。Bini等開發出了一種帶有光化學性質的CRP特異性適配體，當血液中的CRP濃度超0．005mg/L時就能被檢測出來，敏感度非常高。這一成果為新型CRP診斷試劑的研制奠定了基礎。SELEX技術還被應用在病原微生物的檢測，其能克服傳統檢測方法在特異性和敏感性上的缺陷，為新型檢測試劑盒的開發提供有力支持。例如結合分支桿菌的特異性適配體CSRI2．11檢測過程比傳統的培養鑒定法更省時更敏感;丙型肝炎病毒的適配體ZE2可結合酶聯免疫吸附試驗實現丙型肝炎的早期篩查，不受抗體檢測時窗口期的制約;瘧原蟲乳酸脫氫酶的適配體PL1在臨床實踐中，可以很好的區分患者是否感染了出間日瘧原蟲或惡性瘧原蟲。
3．3SELEX技術在疾病治療中的應用SELEX技術在疾病治療中的功效越來越來受到人們的重視。適配體在體內與靶分子結合，理論上可以對靶分子的生理功能和代謝過程產生影響，靶分子也會因此發生信號傳導的改變甚至喪失原本的功能，直接或間接阻斷疾病發生進程。以此開發的靶蛋白功能阻斷劑，日益顯示出其巨大的潛力。全球首個適配體藥物是2004年由美國食品和藥物管理局批準上市的哌加他尼鈉，可用來治療老年性黃斑變性。SELEX技術在凝血系統疾病的治療上具有一定的意義，已找到了可用作抗凝血和抗血栓藥物的適配體REG-1，其結合的位點是凝血酶的肝素結合位點以及纖維蛋白原結合位點。在治療免疫系統疾病方面，也已獲得了具有藥物開發潛力的特異性適配體，如可用來拮抗自身抗體已達到治療系統性紅斑狼瘡的適配體，還有能刺激T細胞釋放的4-1BB的適配體。對于腫瘤的治療，基于SELEX技術研制的適配體藥物更是走在前列，進入到了臨床試驗階段。如對實體瘤和復發性急性髓樣白血病有良好療效的AS1411，更出現了連接金納米棒的適配體，用作腫瘤靶向光熱治療。適配體藥物作為抗病毒藥，也展現出良好的前景，比如用來抑制狂犬病病毒的復制和干擾艾滋病病毒的體內合成。除此以外，核酸適配體還可作為運輸工具，特異性地把藥物運送至靶標細胞或組織達到定點清除的治療效果，研究比較成熟的有裝載著阿霉素，用來殺傷前列腺癌細胞的復合適配體藥物。
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1.3增設一些有特色的選修課以加強學生對當前最新技術的了解和應用。如針對檢驗科的大型儀器設備，檢驗人員只需了解儀器性能及常見故障排除。因此，可以將《檢驗儀器維修》這門課程改為選修課或以專題講座形式開出。也可將幾門臨床主干課程中的臨床檢驗儀器集中為臨床檢驗儀器學課程，避免重復講授。為加強實驗室質量控制，開設《臨床實驗室管理》課程，可以將生化、免疫、細胞等質量管理的內容集中起來，不必在多門專業課中重復講授;而針對《臨床實驗室管理》內容比較抽象，可以組織學生在臨床實習期間邊實踐邊學習，其教學效果會更好。
2課程開設順序
課程開設順序總體要求是通識課程、專業基礎課程、臨床醫學課程、專業課程、選修課，這樣依照學科的發展、知識的關聯與銜接來設置。有平行課程時要平衡開課實驗室和教研室的學年工作量。實訓課中的軍事訓練建議在新生入學時安排，以規范學生的行為習慣，養成良好的時間觀念、組織紀律觀念、集體觀念和講求規范及雷厲風行的工作作風，促進校風校紀建設;社會實踐課應安排在每年的寒假和暑假進行;臨床見習時間宜安排在進入專業課之前;畢業實習安排在最后一學年。
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醫學美學,作為醫學領域中一個新興的獨立的系統科學，是醫學和美學原理交叉的學科。“要求學生掌握的是如何實施對人體的美學研究、美學維護、美學修復和再塑人的健康之美”現代醫學美學的興起與和醫學審美的更高層次發展，促進了研究與實踐并取得顯著成果。但是目前也出現了各種問題，出現了很多整容美容事故，主要原因是不了解美學規律，不遵循美學規律地亂動刀子。
三、數字媒體介入前兩者結合中的運用前景
（一）、教學中的運用。對整個專業知識體系的實踐教學環節進行了改革創新,結合多媒體、投影儀等教學工具，利用計算機采集圖像數據、計算機圖像處理技術,配合攝像機及相應測量用軟件,作為測量分析用具,啟用醫用美學等軟件虛擬測查數據結果。使教學更直觀更具體化。
（二）是與客戶交流的運用，面向特定的群體發展到面向特定的一個人、一個家庭的階段。即是精確化傳播階段，能和受眾（客戶）保持一對一互動，受眾能較易獲得個性化信息，并能通過先進的媒體及傳播技術經濟地、方便地滿足不同受眾的個性化需求。
（三）推廣傳播的運用。大眾傳播、分眾傳播，與精確化傳播相對應。在互聯網、社交網站中使用網頁、廣告等媒體市場推廣體系，最大化數字媒體的營銷效果。
四、數字媒體介入美學教學實踐的改革
（一）美學基礎知識體系的完善
1、既要了解美學基礎知識，又要了解醫學基礎知識。美學主要包括美學基礎知識和基本技能、人體整體美學與各部位美學分析評價技能。醫學美學主要包括實踐指導手冊、醫學美學概論實訓教程等。通過綜合課程體系學習，鞏固美學和醫學美學理論課程的基本知識和基本概念。
2、要配有專門的美學與醫學美學實踐教學畫室和實驗室，配備各種實踐教學器材。
（二）軟件與工具的廣泛使用
利用圖形軟件平面與3D結合，有效地進行人體美學測量，分析與評價的技能應用與實施于臨床。選用計算機、攝像機、自制攝像用頭部固位架、圖像采集卡、相應測量用軟件,作為測量分析用具,尺子、量角規等，整形美化軟件。
（三）課程教學實踐改革
在講解分析中，多與醫生交流醫學美學的理論與原理，結合臨床實際，分析事物與美學的關系及其成因，進行分析并提出措施或建議，培養學生對美學與醫學美學理論原理的應用能力。
1、集體講解，多媒體播放，與醫生共同講解相關解剖知識，養成科學的觀點去看待和解決問題。如頭面部的三停五眼分析與測量，對比例不協調除了使用化妝技術可以改變，還需要微整形或者手術整形改變，需要向醫生咨詢以及完全了解問題的解決。如，瘦臉針、除皺針的恰當使用。
2、素描示范步驟和范例作品講解。用素描方法描繪照片和寫生對象，只有掌握了藝術手段熟練處理問題的能力，才能更好地運用進行計算機圖形軟件處理出需要的效果。藝術手段和計算機的修改可能更加隨心所欲，但是醫學要遵循規律，是需要將對象的個性與標準規律反復進行比對。審美的修養顯得十分重要。如。教師先分析對象特征，再示范觀察方法、比例、結構，表現基本手法，再讓學生分組練習，教師同時進行巡視指導，培養學生動手實踐能力和創新能力。
3、利用各種軟件分析真實照片和虛擬美容整形效果，比較各種數據在審美的差別，認識解剖知識的重要性突出計算機的運用能力和動手能力的培養，啟發學生自己動手，使實踐教學具有規范的動手能力和臨床實踐操作技能。如，打開photoshop軟件，將搜集到的照片導入，拉開輔助線，選中鋼筆路徑作為傾斜鋪助線和修改的描畫。點擊標尺工具進行測量。然后采用人體模型測量或者同學之間互相進行測量，寫出實驗報告，將最后得出的結果做出虛擬效果圖。用VPSS、IFACE等軟件，目前這些軟件還不夠強大，需要結合photoshop軟件使用，最強的是韓國的3D整形軟件syncromaxplus，需要加強對3D軟件的學習，制作出更真實性的3D效果圖。可以很有效的幫助整形醫生的手術。
4、實踐課堂案例式教學。就美學與醫學美學課程教學及教育過程中的有關典型問題，或學生關心的現實生活中的見聞，或學生自己容貌方面的憂慮煩惱等，作為實踐課堂案例來進行教學。例如，比較典型的東西方數據差別，加強民族審美意識，不盲目整形。
五、專業實踐、企業實習
實行產學結合，在全省范圍內確立了教學實習基地，讓學生到實習基地去見習實習學習，如參與美容醫院的各種美容治療或美容手術的實習見習，實習見習各階段寫出美的切身體會與實驗報告。參加美學與醫學美學講座、學術交流等活動。讓學生熟悉美容業的生產、建設、管理、服務工作，為美容第一線職業崗位輸送高素質的應用型人才打下基礎。
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已經成為醫療衛生單位增強核心競爭力和衛生技術人員提高能力素質的主要途徑，“十二五”計劃提出的繼續醫學教育目標基本實現。本文通過調查發現有82.8％的醫療衛生單位開展繼續醫學教育活動，其中100％的縣級及以上單位開展繼續醫學教育。96％被調查的衛生技術人員在2013年已經獲得超過25個繼續醫學教育學分，100％的市及省級醫療衛生單位舉辦的繼續醫學教育項目學科（二級）。
（2）全省已經形成運轉靈活、層次清晰、系統有效的繼續醫學教育組織管理體系
本次調查結果顯示，100%的醫療衛生單位有專職人員管理繼續醫學教育。96%的醫療衛生單位制定了年度計劃并進行工作總結，99%的醫療衛生單位制定了繼續醫學教育管理與實施辦法，初步建立起統一領導、分工明確、協調有力的工作機制。
（3）全省通過開展內容豐富、多形式的繼續醫學教育活動
激發了醫務人員的學習需要，建立了一個較好的學習平臺。本次調查結果顯示，100%的單位把繼續醫學教育學分作為職稱晉升的條件，90%的單位把繼續醫學教育學分作為年度考核和執業再注冊的條件，68.8%的單位把繼續醫學教育學分作為崗位聘任的條件，不僅能夠充分調動個人和單位的積極性，還能確保繼續醫學教育的質量和水平。
2存在的主要問題包括以下五個方面
（1）衛生技術人員參與繼續醫學教育活動差異性較大
各個級別衛生技術人員的技術基礎水平不同，基礎技能和基礎知識的水平也不同，因而需要接受的教育內容和形式也不同。
（2）醫療衛生單位繼續醫學教育工作發展不平衡
從不同級別醫療衛生單位來看，省市級醫療衛生單位繼續醫學教育工作明顯好于縣鄉級醫療衛生單位，基層工作開展較差。
（3）繼續醫學教育經費投入不足
本次調查發現，55.9％的單位沒有專項經費，44.1的單位有專項經費。在參與調查的衛生技術人員中，80％的人需要支付一半的學習費用，49.9％的人需要花費80％的費用，25.8％的人花費20％的費用，6.8％的人不需要花費。這說明我們應當加強對繼續醫學教育經費的投入。
（4）繼續醫學教育資源未得到有效利用，繼續醫學教育形式還不夠豐富
本次調查結果顯示，69.2％的參加形式為網絡學習，18.9％為學術會議，13.6％為自學，13.2％為參加培訓班，12.9％為函授，7.3％為脫產進修。由于各級醫療衛生單位的經濟等條件有差異，繼續醫學教育的方式主要為講課，無新意，衛生技術人員的學習情緒不夠。
（5）繼續醫學教育認識程度不夠
由于經濟條件或繼續醫學教育活動的質量等條件不同造成基層衛生技術人一樣對繼續醫學教育的認識程度不足。
二討論
繼續醫學教育是國家實施衛生人才戰略和實施“科教興國“戰略的重要途徑，同時其也是組成衛生事業發展的重要部分。為了更好的提高衛生事業為人民服務的基礎，山東省各級衛生行政部門都在積極發展繼續醫學教育事業，積極制定繼續醫學教育事業發展的措施和規劃，不斷加強對繼續醫學教育工作的領導，對繼續醫學教育事業的平衡發展進行統籌規劃。通過本次調查研究，我們發現，全省范圍內的各醫療單位繼續醫學教育工作發展不平衡，部分基層醫療單位的繼續醫學教育工作發展滯后。針對上述現象，我們應當建立多層次需求的繼續醫學教育培養模式、建立繼續醫學教育評價和監督機制，為醫務人員建立良好的繼續醫學教育發展環境，不斷提高全省醫學繼續教育的質量和效率。具體如下：
（1）建立繼續學習教育評價和監督機制
隨著繼續醫學教育的不斷發展，我們應當不斷修訂和完善與其相關的規章制度，以便推動全省繼續醫學教育的發展。因此應當通過建立繼續學習教育評價和監督機制來提高繼續醫學教育的效益和治療，加強對繼續醫學教育管理人員的培訓，確保繼續醫學教育工作能夠有序的進行。同時不斷完善醫學教育登記、考核和評估制度，將衛生技術人員的繼續醫學教育完成情況和其聘任、考核、職業資格在注冊、技術職務晉升等結合在一起。正確引導衛生技術人員參加繼續醫學教育活動，并將所學學以致用。
（2）營造良好的繼續醫學教育發展患者
各級單位將開展繼續醫學教育工作作為提高自身實力的重要措施，為衛生技術人員創造良好的環境和條件，使其認識到只有接受教育才能執業終生，激發其學習的主動性。
（3）建立多層次需求的繼續醫學教育培養形式
繼續醫學教育工作的重點是堅持以人為本，將終身教育作為其發展的宗旨，不斷對繼續醫學教育的內容、機制和教學方法進行改革，并結合各級衛生技術人員的自身條件，開展有針對性的繼續醫學教學。根據衛生技術人員的知識層面和所在單位的條件，不斷提高醫護人員的自身素質。同時針對基層衛生機構，請專家到基層進行授課，進行面對面的教學，采用座談的方式，使大家的知識相互補充提高。并將互聯網授課廣泛應用其中，使各級學員能夠簡單便捷的學習。
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2網絡信息技術環境下的醫學文獻檢索教學
2.1網絡信息技術將有效地優化文獻檢索教育環境,提高教學質量
長期以來,傳統教學模式是“以教師為中心的課堂教學結構”,而現代教學需要學生掌握計算機和多媒體網絡信息等先進的教學資源,以適應信息資源和信息技術快速發展。現代網絡信息技術環境有利于學生主動地掌握與熟練檢索知識,充分利用各種網絡信息資源以生動活波、形象逼真、多種多樣的形式進行教學。發揮學生的主觀能動性,突出發揮教師的引導、組織作用,通過網絡信息技術建立新型教學模式,使得學生在網絡信息技術的環境下充分發揮其個性、團隊合作及創新能力。例如在講解“檢索技術”內容時,通過實際數據庫結合現實案例,利用網絡信息技術展示具體課題檢索時的工作情景,給學生以直觀、形象的感性認識。通過一些實際案例提高學生對網絡信息技術下檢索知識和技能的認知,為其今后的學習提供推動力。
2.2網絡信息技術促進醫學文獻檢索教學內容的改進與設計
醫學文獻檢索課程教學內容是圍繞信息資源和獲取信息資源的方法與工具展開的。在網絡環境下,信息資源內容和形式都極大地擴展了;網絡信息檢索已成為獲取信息資源的首要且重要的渠道。因此,信息檢索課程教學任務應主要集中在對學生網絡檢索利用技能的培養方面。醫學文獻檢索課程的內容可作以下調整改進:信息檢索基礎內容、網絡基礎、檢索技巧及對網絡信息檢索工具與系統的總體把握。網絡公開學術信息資源的獲取,學術資源導航及其應用,商業數據庫資源系統的檢索方法與技巧,包括中外文數據庫檢索、中外文全文電子期刊檢索、特種文獻檢索等。文獻管理軟件可以幫助我們排列、整理、檢索、閱讀、瀏覽所搜集的大量數字文獻。網絡信息資源的綜合運用,通過課題案例查詢的基本程序和步驟實踐,可使得學生掌握從信息獲取到信息綜合利用過程。學生通過醫學文獻檢索課程與信息技術結合的系統性教學學習,可以提高信息素養,增進交流,拓寬視野,為今后的學習和科研生涯打下良好基礎。
2.3多媒體教學在文獻檢索教學中的作用
在網絡環境下,信息多媒體技術作為醫學文獻檢索教學的支持,可以充分發揮教師的主導作用,突出學生在實際教學中的主體地位,實現師生相互交流,提高實際教學質量和效率。網絡信息技術環境下,通過多媒體互動資源,生動形象地將生澀難懂的理論變為生動的圖像,能激發每一位學生的學習熱情和興趣,真正快速提高學習效率。多媒體教學可以發揮網絡信息傳輸功能,醫學文獻檢索課是以了解基本檢索概念、掌握信息檢索技術和技巧為主。如果教師只是講解和演示,學生就很難理解,沒有具體形象的認識,就不能夠理解信息檢索意義所在。多媒體課件的動態演示會使得抽象知識變得直觀形象,可以進一步培養學生的信息思維能力、綜合分析處理信息能力以及解決實際問題的能力,并最終形成自我觀察分析的能力。
2.4充分利用網絡信息技術,保持醫學文獻檢索課程內容的前沿性
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(3)醫學教學素材眾多，難以長期保存。
(4)醫學知識繁瑣、復雜，課堂上老師苦于難把大量的知識傳授于大家，多數老師一味填鴨式的講授，不僅不會增加學生學習的效率，還會使學生產生厭煩情緒。學習資源和信息。
2多媒體技術在醫學教學中的重要性
(1)計算機多媒體技術把枯燥無味的知識形象、滿足不同學生的不同需要，使得學生在一定時間內盡可能獲取更多的知識。
(2)多媒體技術可以節省板書時間，大大提高了課堂效率，還可以增加與老師溝通互動的機會。
(3)多媒體技術的應用改變了傳統醫學教學過程單調枯燥的局面，完全可以在課下依靠網絡加強學習，而且多媒體技術實現了資源的共享，為學生提供了更多的
3多媒體教學在醫學教學中應注意的事項
多媒體教學在醫學教學中產生了重大的變革，但是，應用多媒體時，應將多媒體作為教學的助力，不能成為教學的絆腳石。所以，使用多媒體技術時，應注意以下幾個方面。
(1)避免遏制學生的想象力。這就造成教師在課堂上過多的進行電腦操作，引導學生按照課件的指示進行學習，在一定程度上抑制了學生的想象力。
(2)避免重回填鴨式教學。多媒體技術的廣泛應用使教師的板書量大大減少，造成學生沒有足夠的時間進行思考，導致教師無法全面的掌握學生學習的具體情況，對于教學中存在的問題不能及時發現和改正。
(3)避免過度依賴多媒體教學，使教師學生之間失去互動性。學生也不會再認真地去做筆記，整理自己的學習思路和知識體系，而是變得更愿意去依賴拷貝教師的教學資料。
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學生給予口腔正畸工藝技術課程高度的學習熱情及關注，能夠清醒認識到行業企業對于口腔正畸專業人才的迫切需求，因此對于課程的學習較為認真、踏實。但本次調查顯示，學生對于理論知識部分的掌握程度不盡如人意，究其原因，主要在于本課程采用傳統理實分開授課的教學模式，學生對于抽象的理論知識理解難度較大，理論授課結束后開展實訓時，存在理論知識部分遺忘的現象。理論與實驗教學銜接不當[2]是一個急需通過教學模式調整及課程教學改革解決的問題。
3課程地位隨行業發展而變化
隨著人們生活水平的日益提高，對于口腔健康的要求已不僅僅局限于“無病”，而更多著眼于美觀與功能良好，這使得口腔正畸治療得到了越來越多的關注，也使得口腔正畸技術得以迅猛發展，越來越多的人選擇口腔正畸治療。與此同時，口腔正畸技術的發展也帶動著口腔正畸修復專業技術的不斷發展及變革，使得行業企業對于口腔正畸專業人才的需求不斷提升，口腔正畸修復專業技術人才緊缺的問題日益明顯，這對于口腔醫學技術專業人才的培養提出了全新的、更高的要求。口腔正畸工藝技術課程無形中從一門普通的專業課程變成一門直接關系畢業生就業的專業核心課程，口腔正畸工藝技術也成為越來越多相關企業希望畢業生熟練掌握的專業技能。
4課程設置及教學模式改革的重要性
就口腔正畸工藝技術課程來看，其發展相對于其他專業核心課程慢，授課方式依舊沿用傳統的理論實驗分開教授的教學模式，弊端顯而易見。為更好地滿足行業企業對口腔正畸工藝技術專業人才知識與技能的要求，調整課程設置、進行教學模式改革已經刻不容緩。教學做一體化教學模式[4]在其他專業核心課程中教學效果良好，也積累了一定的經驗，但由于每門課程都有其自身的特點及特殊性，把其他課程適合的教學模式照搬過來并不一定適合。因此，需要分析教學做一體化教學模式在其他核心課程中開展的情況，依據行業企業對于專業人才知識結構的要求，探索有口腔正畸工藝技術課程特色的教學做一體化教學模式，改變原有的理論與實驗教學脫離的教學組織形式，這對于培養高素質、技能型專業人才至關重要。
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2.1實驗診斷前的準備工作
首先實驗診斷技術人員必須提高自己的知識水平，不斷學習，鉆研專業技能，經常去醫院了解醫學發展動態，以便使教學與臨床實踐緊密結合，從而獲得更多、更新的知識。其次，上課前要熟悉每個實驗的目的、要求、試劑配制、用具的準備、提前預示，以掌握實驗診斷的全過程和預計可能出現的問題。例如，微生物基礎實驗課中如果標本制作的結構不清楚、不典型、染色模糊、有人工假象，那么學生觀察起來則很吃力，不能獨立找到所要了解和掌握的結構內容。還有在進行細菌生化鑒定方面實驗時，如果沒有進行預示，不知道細菌培養生長的情況如何，實驗診斷中出現的問題就很難給學生解釋，這就必然影響學生的實驗情緒，影響實驗診斷結果。因此實驗診斷前的準備工作至關重要。
2.2運用實驗診斷教學方案
傳統的教學模式往往是教師牽著學生的鼻子走，多以“滿堂灌”方式指導進行實驗，故導致學生有依賴心理，不動腦思考，對實驗診斷過程及結果不甚明傳統的教學模式往往是教師牽著學生的鼻子走，多以“滿堂灌”方式指導學生進行實驗，故導致學生有依賴心理，不動腦思考，對實驗診斷過程及結果不甚明了，從而使整個實驗課效果不理想。近年來，我們在教學中開展了綜合性實驗診斷教學，即學生獨立設計和完成一次實驗，教師只提供必要的器材和試劑，提出實驗診斷技術要求和操作事項。
2.3做好實驗診斷的考核方法
以往實驗成績的考核，過分依賴報告的優劣，導致學生不注重實驗過程，片面追求實驗結果的正確性和實驗報告的篇幅與整潔程度，嚴重制約了對學生綜合素質的培養，導致學生對實驗課的不重視，不當回事。近幾年我們將實驗課獨立出來，成為單獨的一門課后，學生普遍重視起來，提高了他們對實驗的重視程度，調動了他們學習的積極性，保證了成績評定的客觀和公正、提高了實驗的教學效果。
3展望
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2．1模板DNA提取和質量檢測
模板DNA提取的方法有很多，應根據組織的不同和試驗需要確定，但其基本的原理相同，都是通過酶或有機試劑裂解組織使核酸游離出來，然后通過有機溶劑或吸附柱純化后提取。核酸的濃度和質量可通過UV分光光度計讀取D260nm與D280nm的比值和1％瓊脂糖凝膠電泳等檢測來確定（Mohini等，2011）。目前已有很多商品化的核酸提取試劑盒可供選擇，使用方便并可得到較高質量的模板（DNA或cDNA）。
2．2隨機引物的選擇
隨機引物長度通常為10個堿基，GC的含量為60％～80％的寡聚核苷酸鏈，隨機引物不僅核苷酸的排列順序是隨機的，而且所有引物的序列無直接相關性（韋莉萍，2001）。理論上，如果1條隨機引物反應可產生x個獨立的條帶，那么a條隨機引物同時參與反應就可得到xa2個條帶，但多條引物同時參與反應會相應的增加結果的復雜性和不穩定性（Nandani等，2014）。隨機引物雖然可用于所有物種，但并不是所有的隨機引物擴增出來的結果都有意義，想要得到較為理想的結果仍需根據研究對象和研究目的進行引物的篩選和反應條件的優化，一般來說選擇能產生中等復雜度的圖譜的引物（Nandani等，2014）。
2．3AP－PCR擴增條件
AP－PCR也包括變性、退火、延伸的經典PCR過程。變性過程在94℃進行，一般來說預變性3～5min；退火溫度在35～38℃，也可根據引物Tm值來確定，一般退火溫度比引物Tm值低3～5℃；延伸溫度在72℃，在此溫度下Taq酶的合成效率約為2000bp／min（Kumari等，2013）。AP－PCR的試驗條件、模板的質量和濃度及反應體系中Mg2＋的濃度等都可能對擴增的結果產生影響，想要得到較為理想的試驗結果，反應體系的優化和試驗操作的標準化是非常重要的（Mohini等，2011；Kumari等，2013；Babu等，2014）。
2．4AP－PCR的優點
AP－PCR延續了PCR的效率高、靈敏度高、樣品用量少等優點，同時又兼有自身的優點：①不同種類的生物樣品即可使用通用的隨機引物進行基因分析（Welsh等，1991）；②可在對研究對象不了解的情況下進行基因多態性分析，從而對研究對象進行遺傳分析和分類研究（Williams等，1990；Welsh等，1991）；③對于研究對象DNA樣品量有限的情況也適用（Nandani等，2014）；④隨機引物易獲得，試驗成本低，技術容易掌握，除此之外，可對AP－PCR產生的基因條帶進行純化和克隆，以便進一步分析（Ge等，2014）。
2．5AP－PCR的局限性
AP－PCR雖然具有很多獨特的優勢，但目前仍處于應用的探索階段，其本身仍有局限性：①AP－PCR技術通常是對顯性基因標記進行分析，這就意味著不能將純合子與雜合子區別開（Babu等，2014）；②由于無明確的目的序列，如果發生擴增條帶的缺失就無法得知是什么原因導致的，不利于對擴增結果的分析（Kumari等，2013）；③AP－PCR的結果分析需要專業的帶譜分析知識，否則很難從結果中得到有意義的信息；④AP－PCR結果的重復性問題一直是限制其廣泛應用的主要原因，由于其結果受DNA模板的質量、反應體系成分和反應條件的變化等因素的影響，其擴增產物的穩定性難以控制（Mohini等，2011）；⑤AP－PCR結果通過凝膠電泳來觀察，但遷移率相同的譜帶的核苷酸同源型不明等情形易造成干擾，有時電泳遷移率相同的片段并非同源，這就給結果分析帶來很多不確定性（Nandani等，2014）。
3、AP－PCR技術研究進展
3．1AP－PCR技術自身的優化
近年來，不斷有研究者對AP－PCR技術進行改進和優化，使其更具可操作性、實用性和更廣泛的應用領域。劉剛等（2004）對AP－PCR進行了優化，建立了多重隨機引物PCR（M－RAPD）技術，M－RAPD通過使用3條組合的隨機引物在較高的退火溫度下對肺炎鏈球菌、糞腸球菌和大腸埃希菌耐藥菌株等的染色體DNA進行擴增獲得了穩定的種株特異性的DNA指紋圖，其所提供的基因信息要遠多于傳統的RAPD技術。Xiong等（2012）對AP－PCR進行了反應程序優化和隨機引物中G／（G＋C）不同比例研究，結果表明，反應程序中從退火步驟到延伸步驟的時間延長，溫度變化由3℃／s下降到0．3℃／s時，PCR產物條帶明顯增加，這可能是由于延長溫度變化的時間可提高引物與模板結合的穩定性（Fu等，2000），在比較了隨機引物中G／（G＋C）不同比例的PCR產物后發現，當G／（G＋C）比例在0．7時PCR產物的條帶最多，也更適用于進行AP－PCR反應，因此反應程序的溫度變化和隨機引物中G／（G＋C）的比例可能也是影響AP－PCR結果的重要因素。Zou等（2003）報道了利用兩步AP－PCR方法在微量DNA樣品中擴增未知序列DNA并進行克隆。第1步PCR利用29個核苷酸序列的引物進行擴增，Ran5－29（5′－GTTCTACACGAGTCACTGCA－GNNNNNNNTGGC－3′），這一隨機引物包括21個已知核苷酸序列部分，7個隨機核苷酸序列和1個3′端TGGC的卡子結構，在隨機序列前6個核苷酸序列構成了1個PstⅠ位點，其中3′端卡子結構在退火時可與含有GCCA位點結合，保證了隨機序列可與GCCA上游的序列匹配，3′端TGGC的卡子結構可使引物與模板的匹配數增加7～11個核苷酸，PstⅠ位點決定PCR產物的長度，并保留1個黏性末端，保證了克隆的順利進行。第2步PCR使用可與Ran5－29相匹配的19個核苷酸的Fix5－29（5′－GTTCTACACGAGTCACTGC－3′）作為引物，獲得的產物進行純化、克隆分析。結果表明這種策略可檢測臨床樣本DNA的最小量在1pg，克隆靈敏度達到100fg目的DNA模板。這種方法較普通AP－PCR靈敏度更高，適用于樣本量極少的臨床樣品檢測。Clem等（2007）在對比了AP－PCR方法的不同擴增策略，在此基礎上建立一種快速有效的檢測不明病原的多重隨機RT－PCR方法。在對血液樣本進行過濾后加入了DNase和RNase消化，利用宿主基因對DNase和RNase敏感而衣殼保護的病毒對其不敏感的特點，去除宿主自身基因的污染。其利用單一十聚核苷酸為引物，引物序列為（V8A2）5′－VVVVVVVVAA－3′，V＝A、G或C，3′2個A提供了一個“lock”結構，引物中不含有胸腺嘧啶脫氧核苷酸（T）可避免發生引物二聚體，但這一結構不可避免的會影響引物與模板的結合。試驗結果一旦監測到病毒的擴增產物即可通過鳥槍法克隆測序鑒定。這一方法對病毒的出現或重組進行快速監測和鑒定有很強的實用性，其檢測靈敏度達到1000克隆／mL，應用這一技術成功從血液樣品中檢測并獲得了3種獨立病毒的部分序列。
3．2以AP－PCR為基礎衍生的分子生物學技術
隨著分子生物學技術的發展，單一的AP－PCR技術已不能滿足研究的需要，因此為了克服AP－PCR的一些缺點在其基礎上衍生出包括非序列依賴單引物PCR（SISPA）、簡并核苷酸引物PCR（DOP－PCR）、DNA擴增指紋印記（DAF）、微衛星引物PCR（MP－PCR）等分子生物學技術。SISPA方法最早是由Reyes等（1991）建立起來的，其以AP－PCR為基礎，非對稱的單一引物與DNA模板的鈍末端直接連接，隨后經過若干循環的變性、退火和延伸后，模板的數量得到擴增，后經克隆、測序、分析得到基因序列。Breitbart等（2005）在SISPA的基礎上建立了DNase－SISPA聯用的方法，增加了樣品過濾和DNA酶消化等步驟，成功的從人的血液臨床樣品中發現了新的病毒基因。Djikeng等（2008）在已有研究基礎上進行了新的改進，在樣品的處理中加入RNase酶以清除外源RNA的污染如核糖體RNAs。針對有polyA尾的病毒，在反轉錄過程中加入六聚核苷酸隨機引物5′端加入一段病毒特異性引物序列，形成結合引物（FR26RV－N：5′－GCCGGAGCTCTGCAGATATC－NNNNNN－3′），同時加入連接polyT的引物（FR40RV－T：5′－GCCGGAGCTCTGCAGATATC－TTTTTTTTTTTTTTTTTTTT－3′）以增加對病毒基因3′端的覆蓋率。這種在六聚體隨機引物連接一保守序列即病毒特異性引物，可增加對病毒基因5′的捕獲，從而使SISPA的成功率大大提高。DOP－PCR技術是在AP－PCR基礎上建立起來，其引物（DOP－ORI－Xho）由22個核苷酸組成，3′和5′端的特異核苷酸序列和中間的6個核苷酸構成的隨機引物組成（Telenius等，1992）。由于隨機引物的簡并性，每個反應包含著數以千對的引物。DOP－PCR的反應程序包含2個不同的部分，前5個循環引物的3′端至少有12個連續的核苷酸與模板DNA相結合，對引物和模板的匹配度要求不高，在隨后的30～40個循環里，擴增錯配的幾率會逐漸降低。初始反應產物將成為模板，用相同的引物進行擴增，擴增產物通過克隆測序即可獲得基因序列（韓燾等，2013）。Csaba等（2002）打破了DOP－PCR只用同一種引物的傳統，嘗試了5條新的可用于反應的引物，使反應時間由原來的7～8h縮短為2h，縮短了變性過程的時間，在取得理想結果的同時，減少了擴增酶的用量，提高了DOP－PCR的效率和實用性。DAF是一種改進的AP－PCR分析技術，與AP－PCR技術不同的是，DAF使用的引物濃度更高，長度更短（約5～8個堿基），在PCR反應上只包含2個溫度的循環，省去了延伸的步驟，使用聚丙烯酰胺凝膠電泳，通過銀染方法觀察結果。DAF通常會產生非常復雜的帶型，因此它所提供的譜帶信息也比AP－PCR大得多（Caetano－Anolles等，1993）。Al－hag等（2007）應用DAF鑒定8株細胞系，研究結果表明，DAF可產生穩定的可供區分的PCR譜帶。Ehsan等（2011）應用DAF技術對分離到的25株牛隱孢子蟲進行亞型的鑒定，結果發現分離的25個蟲株分屬于為3個不同的亞型。MP－PCR是以AP－PCR為基礎的分子標記技術。Ma等（1996）發現真核生物基因組中存在短串聯重復序列，又稱微衛星DNA或簡單重復序列（simplesequencerepeats，SSR）。真核生物基因組中SSR的分布是隨機的，大約每隔10～50kb就有1個SSR。SSR位點最常見是雙核苷酸重復，即（CA）n和（TG）n，每個微衛星DNA的核心序列結構相同，重復單位數目10～60個。MP－PCR的引物是與SSR位點互補的二聚或三聚核苷酸重復序列，如其引物序列可是（TA）10或（CGA）6，擴增的是SSR之間不同長度的DNA序列，將擴增產物進行凝膠電泳，根據分離片段的大小決定基因型并計算等位基因頻率（Dawson等，2013）。MP－PCR克服了AP－PCR引物的不確定性，增加了PCR產物譜帶的穩定性和針對性，該技術也已廣泛應用于物種分子標記、基因圖譜繪制和基因差異性分析等方面（Tian等，2014；Ding等，2014；Wei等，2014）。
3．3AP－PCR與其他分子生物學技術的聯用
擴增片段長度多態性（AFLP）技術是將基因組DNA先用限制性內切酶切割，然后將雙鏈接頭連接到DN段的末端，接頭序列和相鄰的限制性位點序列，作為引物結合位點（Rikalainen，2013）。針對AP－PCR結果譜帶核苷酸同源性無法確定的缺點，Tan等（2011）將AP－PCR與AFLP進行聯用，利用2種方法各自的優勢，在對可能含有未知病原的臨床樣品進行檢測，以實驗室確診的登革1型病毒為陽性對照，首先用AP－PCR對有限的樣品基因進行隨機擴增，然后使用AFLP技術對進行擴增從而得到樣品穩定的DNA多態性標記。此方法克服了AP－PCR的同源性不明問題，同時比單獨使用的AFLP方法進行檢測的靈敏度提高100倍，在臨床樣品的檢測中有很大的實用價值。高通量的測序技術也被稱為下一代的測序技術，其與AP－PCR技術的配合使用，讓AP－PCR有了更廣闊的應用前景。Hang等（2012）首先使用錨定隨機引物P17N8（5′－GTTTCCCAGTAGGTCT－CNNNNNNNN－3′）進行RNA反轉錄，在通過錨定隨機引物P17N8和P21（5′－CGCCGTTTCCCAG－TAGGTCTC－3′）同時進行AP－PCR擴增，再通過高通量的測序技術對PCR產物進行測序，對得到的基因序列進行拼接處理，從而得到了奧羅普切病毒和卡拉帕魯病毒L片段完整基因序列。vanderHeij－den等（2012）利用序列非依賴性病毒基因片段擴增方法與Roche－454測序技術聯用，成功的從患急性肝炎病犬的肝臟組織檢測出犬Ⅰ型腺病毒基因，研究結果表明AP－PCR技術和下一代的測序技術聯合使用的方法在獲得病毒完整基因序列和檢測病原等方面的實用性。
4、AP－PCR技術在動物醫學中的應用
4．1在傳染病流行病學和病原遺傳學分類中的應用AP－PCR由于其獨特的技術優勢，在獸醫傳染病學和病原遺傳學分類中已得到廣泛應用。Leh－marn等（1992）用此技術對念珠菌屬的分離菌進行分析，試驗結果表明，同一菌種的不同菌型間呈現出DNA長度的多態性；此帶型圖在同一菌種的不同菌型間，其相似程度遠大于不同種的菌株，這也說明每種菌的隨機引物PCR帶型極具特征性。Louie等（1996）用2種引物檢查15株李斯特單核菌相關流行分離株和36株不相關流行分離株。經擴增后的帶型分析，將其分為9個型，每個型中又分有不同的亞型。Zadoks等（2000）在牛乳樣品中分離到23株金黃色葡萄球菌，經AP－PCR鑒定1～8株屬于Ⅰ型菌，9～20株屬于Ⅱ型菌，其余3株分別屬于Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型菌。Butler等（2001）應用該技術對3次牛霉形體暴發流行菌株進行了檢測，結果表明，發生在其中2個養牛場的流行病原菌具有一致的指紋圖，引而具有相同的感染來源，而在另一牛場分離的菌株間則顯示了指紋圖譜的顯著異型性，說明它們具有多個感染來源。王雪敏等（2011）利用多組隨機引物對副雞禽桿菌10個國際標準株、血清C型疫苗株和4個國內分離株進行AP－PCR擴增，結果顯示，所有菌株可分為11個譜型，聚為4類。劃分的11個譜型可和現有分型方法中的不同亞型一一對應，提示這種方法可區分不同血清亞型。AP－PCR作為寄生蟲遺傳學分類鑒定的方法已得到廣泛應用，克服了傳統分類方法難以解決的問題。Macph－eson等（1993）應用AP－PCR技術區分來自不同宿主的7種艾美爾球蟲，結果表明選擇合適的引物可對7種球蟲進行鑒別。張偉信等（2003）應用該技術對雞柔嫩艾美耳球蟲不同地理株的多態性研究，結果表明不同地理株間及同一地理株親代與子代間均存在DNA多態性差異，其中不同地理株間種內變異程度較大，同一地理株子代與親代間也發生遺傳變異，但變異程度較小。
4．2在病原差異基因分析中的應用
AP－PCR技術進行RNA指紋圖譜分析不僅能鑒定基因的表達差異，而且能顯示低水平表達的基因差異。Nicho－las（2000）應用此方法鑒定了絲裂霉素C誘導下鼠傷寒沙門氏菌SOS調控基因表達的差異，結果表明，絲裂霉素C誘導后21條基因譜帶出現表達水平的上調，其中20個基因片段對應的是可辨識的基因序列，15個基因序列與數據庫中基因序列無同源性，被確定為新的表達序列，6個基因片段與SOS基因編碼的調控蛋白有關。Diana等（2005）應用AP－PCR技術對芐硝唑作用下克氏錐蟲基因表達差異多態性的研究，結果發現對芐硝唑敏感和對芐硝唑抵抗種群之間系統指紋圖譜存在一定的差異，其中可能存在克氏錐蟲對芐硝唑擁有抗性的表達機制，雖然抗性種群在芐硝唑作用下系統指紋圖譜沒有明顯的變化，但敏感種群間的系統指紋圖譜卻有著明顯的變化。AP－PCR技術為鑒定基因差異提供了一種快速有效的方法。
4．3在未知病原檢測中的應用
病原微生物引起的動物疫病呈現出復雜性和非典型性等特征，普通的臨床診斷方法很難確定病原的種類，這種情況下使用傳統PCR方法檢測臨床樣品的效率不高，而且存在漏檢可能。AP－PCR技術提供了一個更為全面、快速和靈活的檢測方法，對病原微生物進行全基因組的檢測（姚四新等，2010）。Djikeng等（2008）使用DNase－SISPA技術在牛的血清中分離到牛鼻病毒基因。Clem等（2007）利用改進的AP－PCR方法，從血液樣品中檢測并獲得了3種獨立病毒的部分序列，即腺病毒17、卡薩奇病毒A7和呼吸道合包體病毒B。周斌等（2004）在研究鴨病毒性肝炎病毒時，發現其種毒可能受到污染，隨后挑選4條隨機引物對其進行反轉錄PCR擴增，共擴增出3條基因片段。克隆測序的結果表明，與禽腺病毒（雞胚致死孤兒病毒）基因組部分序列同源性分別高達99．5％、99．6％和99．5％，從而確定了鴨病毒性肝炎病毒雞胚尿囊液種毒受到禽腺病毒的污染。黃欣梅等（2011）采用DNase－SISPA對導致鴨、鵝產蛋下降的病原基因進行擴增，并在此基礎上設計了1對特異性引物成功的擴增出新型鵝黃病毒JS804毒株基因。
篇10
光聲斷層成像系統采用非聚焦激光照射樣品，并采用非聚焦超聲換能器檢測被樣品照射區域周圍的光聲信號，從檢到的光聲信號，反演出成像區域生物組織的光吸收系數的空間分布，并且由此繪制組織被照射區域的光聲圖像。一般在光聲斷層成像的實驗研究中，為了簡化系統的復雜程，減少實驗成本，提高實驗穩定性，往往采用一個超聲換能器對生物組織進行旋轉掃描。
美國圣路易斯華盛頓大學的LiHongVWang在2003年時帶領研究小組利用非聚焦的單陣元超聲換能器對小鼠大腦進行光聲斷層成像，實現了對老鼠大腦皮層的高對比度成像，對大鼠腦部進行光聲斷層成像，血管成像結果與腦部解剖結果十分吻合。隨后各式各樣的單探頭掃描實驗系統用于小鼠的腫瘤生長、血管變化和關節成像。使用單陣元非聚焦超聲換能器采集光聲信號，對于每次采集到的距離換能器不同半徑弧的光聲信號光聲信號，需對其求積分。因此不能采集單一方向的光聲信號，需要圍繞生物組織旋轉換能器，采集樣品各個方向的光聲信號，最終通過數值計算模擬出光聲圖像。該實驗裝置由于只需一個超聲換能器，信號采集電路比較簡單，成本較低。但由于加入了旋轉機構旋轉超聲換能器，實驗裝置的結構變得相對復雜，采集數據時間稍長，而且引入了機械振動誤差，成像結果受機械硬件影響較大。于是發展出陣列圓形掃描系統，采用這種方式的系統采集多個通道的光聲數據。可以有效地減少信號采集時間，因此這種采集方式被大多數實驗者采用。LihongV•Wang等首次用512個陣列的環形探頭實現了高分辨率的大腦血管實時成像，并對小鼠腦中的光聲造影劑進行了監控。V•Ntzi－achristos等也用64個陣元組成180°圓弧對小老鼠的腹部、胸部和心臟進成像，它的動態圖像幀頻能達到10Hz。
篇11
結核性腦膜炎的危險因素包括年齡，合并艾滋病感染，營養不良，兒童近期麻疹感染，酗酒，惡性腫瘤，成人免疫抑制藥物的使用以及社區疾病的流行。兒童患者尤其是＜5歲的幼兒TBM的發病率顯著增高。結核性腦膜炎的致病菌為結核分枝桿菌。結核分支桿菌是一種革蘭氏陽性、需要、有芽孢的、無運動能力的放線菌目。它具有抗酸性，最常見的抗酸染色法為Ziehl-Neelsen染色法。改良羅氏培養基為培養結核分枝桿菌最常見及最廣泛使用的培養基。TBM主要發生在免疫力低下的患者中，合并HIV感染、酗酒、營養不良等患者中TBM的比例明顯增高。結核分枝桿菌主要通過飛沫傳播。結核分枝桿菌主要在肺泡巨噬細胞中繁殖。細菌通過血液循環，在2-4周內播散到肺外組織以及腦膜、腦實質相鄰部位產生結核性肉芽腫。這些病灶通常存在于腦膜和大腦表面的軟腦膜或室管膜下。肉芽腫內的結核分枝桿菌可處于休眠狀態數年。當干酪樣肉芽腫內的結核分枝桿菌進入到蛛網膜下腔時可發展為結核性腦膜炎。
3發病機理
3.1病原體因素
目前全球主要發現有四個基因譜：印度洋、東亞、東非/印度、歐美[7]。不同基因型的結核分枝桿菌的菌株致病性不同。例如，北京株的結核分枝桿菌與TBM的發病關系密切，歐美菌株主要引起肺結核[8]。此外，這兩種不同基因型的結核分枝桿菌侵犯在宿主時中臨床表現不同。例如，由東亞/北京基因型的菌株引起的腦膜炎的病程相對較短，并且表現為腦脊液中的白細胞數降低，這表明不同基因型的結核桿菌能影響疾病的進程以及顱內的炎癥反應[9]。東亞/北京型菌株與耐藥性結核以及HIV的高發病率緊密相關。泰國的一項回顧性研究發現東亞/北京菌株的一些亞型與TBM的CSF白細胞計數以及疾病的嚴重程度有關，但是與死亡率無明顯相關性。
3.2宿主因素
結核分枝桿菌是一種寄住在宿主巨噬細胞的吞噬小體中的細胞內寄生病原體。受感染的巨噬細胞凋亡是宿主殺滅結核分枝桿菌的一個有效機制。結核分枝桿菌已進化出多種基因型以對抗宿主的免疫反應，使得它能夠在宿主的巨噬細胞內長期存活和繁殖。結核分枝桿菌細胞壁中兩種重要的糖脂:前體脂甘露糖、脂阿拉伯甘露糖脂。脂阿拉伯甘露糖參與抑制了吞噬小體的成熟、細胞的凋亡、巨噬細胞的γ干擾素信號以及樹突狀細胞分泌IL-12。有研究表明，致病性的北京菌株可誘導巨噬細胞分泌大量TNF-α，IL-10，并且下調Toll樣受體-2、Toll樣受體-4以及MHC-Ⅱ類分子的表達。宿主基因的異常能增加結核分枝桿菌的易感性[10、11]。有研究發現LTAH4基因能夠干擾體內TNF水平并且通過觸發異常的炎癥反應增加TBM的易感性。一些研究人員還發現了P2X7受體（一種ATP-Ca2+門控通道）基因具有多態性。通常情況下，P2X7受體的激活可誘導宿主細胞的凋亡和感染性結核桿菌的死亡。但是具有多態性的宿主的巨噬細胞出現了凋亡障礙以及殺滅結核分枝桿菌的缺陷。目前發現Toll樣受體的多樣性與TB的發病有關。Toll樣受體有12個成員，分別能識別病原體、激活并啟動固有免疫、產生細胞因子，最終促進適應性免疫應答的形成。一項最新的調查研究顯示，Toll-IL-1受體域的適配蛋白基因的單核苷酸多態性與TBM的發病風險緊密相關。Toll樣受體-2的多態性已被證明能夠增加宿主患嚴重形式的結核如結核性腦膜炎、粟粒樣肺結核的易感性[12]。這些基因中的單核苷酸的多態性被認為是影響細胞因子的水平以及個體對結核的易感性及抵抗性。γ干擾素基因的多態性也與結合的易感性相關。宿主的易感性與多種因素相關，如患者年齡、致病菌的基因型、病原體的毒性、合并HIV感染以及其他未知的因素。
3.3免疫發病機制
TBM的免疫發病機制至今仍不十分清楚。結核分枝桿菌進入中樞神經系統，巨噬細胞立即識別它們并啟動相應的固有免疫和適應性免疫應答。隨后的炎癥反應可導致血腦屏障的破壞、腦水腫以及顱內壓的增高。小膠質細胞是CNS對結核桿菌產生免疫化學反應的主要細胞。一些研究顯示，小膠質細胞能夠產生多種細胞因子，啟動或促進中樞神經系統的免疫應答（通過促進外周組織中的免疫細胞進入腦組織）。血清及腦脊液中TNF-α、γ干擾素升高的水平與結核性腦膜炎的嚴重程度呈正相關。目前有研究證實合并HIV感染的患者中腦脊液炎癥反應可減輕。腦脊液中的γ干擾素水平的降低與死亡獨立相關，這表明γ干擾素能夠提高宿主的免疫及生存[13]。
4病理學特征
空氣中飛沫中的結核分支桿菌進入人體后觸發肺泡巨噬細胞的級聯反應。菌血癥初期，結核分枝桿菌可血行傳播至身體各個部位，包括腦膜。TBM容易侵犯大腦基底部，引起腦膜應對結核分枝桿菌抗原的強烈的炎癥反應。TBM特征性的病理學特點是腦膜的炎性反應、纖維蛋白性滲出、結核性血管炎以及腦脊液流出通路受阻導致腦積水。結核性滲出物經在腦組織表面會產生不同程度的腦水腫、血管周圍炎性細胞浸潤、反應性的小膠質細胞增生，這些反應被統稱為“邊緣性腦炎”。TBM顯微鏡下的病理學特征為上皮細胞肉芽腫形成、朗格漢斯細胞、淋巴細胞浸潤以及干酪樣壞死。70%的患者有不同程度的血管炎和腦梗死，而大腦中動脈等的大面積腦梗塞僅見于3.2%的患者。滲透、增殖性和壞死性血管炎是導致血栓形成的血管病理基礎。腦血管的變化特征為炎性反應、血管痙攣、收縮，最終導致腦血栓形成。通過炎性滲出物的腦膜靜脈也表現出了不同程度的靜脈炎。基底池和室管膜的滲出物粘連，室間孔、中腦導水管和第Ⅳ腦室正中孔或側裂孔狹窄閉塞，腦脊液循環受阻，導致不同程度的梗阻性腦積水。
5臨床表現
醫學研究委員會量表用來評估TBM的嚴重程度。根據這個量表，TBM患者病程可分為三期:Ⅰ期的病人意識完全清醒并且無局灶性的神經系統癥狀；Ⅱ期患者可有感覺異常和局灶性神經功能缺損癥狀如輕偏癱和顱神經麻痹；Ⅲ期病人可有昏迷和嚴重的神經功能損害如多顱神經損害、嚴重的偏癱或截癱。大多數結核性腦膜炎患者在發展為腦膜刺激癥狀之前2-8周有前驅不明原因的感染等疾病病史。常見的非特異性癥狀包括:疲倦、納差、乏力、體重減輕、發熱、頭痛及肌肉酸痛。疾病發展到一定階段患者可出現顱神經損害、視力下降、局灶性神經功能缺損、頸項強直、顱內壓增高等癥狀。老年患者常缺乏非典型臨床癥狀延誤診斷。老年人結核性腦膜炎患者可出現亞急性癡呆如記憶障礙和人格改變的典型額葉樣病變。小兒患者常表現為精神行為異常。HIV陽性患者癲癇的發病率明顯增高。癲癇約發生在50%的小兒患者以及5%的成人TBM患者。癲癇患者的預后較差。低鈉血癥是TBM患者中常見的代謝異常，與預后不良相關。反復嘔吐、ADH分泌異常以及腦性耗鹽綜合征是低鈉血癥的常見原因。低鈉血癥可加重腦水腫，因此需要緊急處理。ADH分泌異常型高鈉血癥多由于下丘腦功能障礙分泌過多的ADH導致鈉水儲留，低鈉血癥多為正常容量型或高容量型。腦性耗鹽綜合征目前認為是由于抗利鈉肽水平升高導致尿鈉丟失過多，并伴隨水分的丟失。臨床補鈉不可過快，防止發生腦橋中央髓鞘溶解綜合征。顱內壓增高是TBM患者最常見的癥狀，并且與死亡率和致殘率相關。顱內壓增高最常見的原因是腦積水，其次是腦水腫。顱內壓增重者可發生腦疝形成。CT/MRI檢查可發現腦室擴大和腦積水。顱內壓增高及腦積水往往提示預后不良。約有20%-30%的患者會出現顱神經的損害。第Ⅵ顱神經損害較常見，第Ⅲ、第Ⅳ顱神經較少受累。顱神經受影響主要是因為基底部的滲出物包繞神經干或者顱內壓增高所致。視力減退也是TBM一種常見并發癥。視神經損害可能的原因為：視交叉性蛛網膜炎、大量腦積水導致第三腦室受壓壓迫視神經、視神經肉芽腫或乙胺丁醇的毒副作用。約有70%的TBM患者發生腦梗塞。梗塞的部位多位于內囊、基底節、丘腦等部位。梗塞多發生于內側丘紋動脈及丘腦穿通動脈供血區。大腦后動脈及其分支的供血區很少受累。梗死可無癥狀，也可以導致嚴重殘疾或死亡，并且與預后不良相關[14]。兒童患者中基底節和內囊梗死的預后較差。單純半球的梗塞預后良好。有證據表明，疾病早期發生的梗塞多由于血管痙攣所致，后期主要原因是血管內膜增生[15]。抗結核治療不能降低腦梗塞的發病率。
6診斷與鑒別診斷
TBM的早期診斷是改善臨床預后的基礎。僅根據患者的臨床表現難以確診或排除TBM，往往確診時已經發生了腦損傷。目前TBM的診斷仍缺乏一個快速、靈敏的方法。
6.1腦脊液檢查
腦脊液檢查是TBM確診的重要檢查方法。特征性的腦脊液改變有助于鑒別其他類型的中樞神經系統感染。典型腦脊液改變為細胞數增多，以單核為主，蛋白增高，糖及氯化物降低。HIV感染患者CSF中細胞數可為0。診斷的金標準為腦脊液中找到結核分支桿菌。TBM患者腦脊液抗酸桿菌涂片的陽性率僅有5-30%。腦脊液培養陽性的臨床診斷率為25%-70%，但是耗時長。HIV相關的結核性腦膜炎細菌涂片和腦脊液培養的陽性率分別為69%和87.9%。增加腦脊液樣本量以及延長涂片檢查時間（至少30min）及反復檢查可提高涂片的陽性率[16]。腦脊液的標本量、癥狀持續時間、腦脊液中中性粒細胞計數、乳酸水平、糖量均與診斷有關。ADA在全身組織中均有分布，在淋巴組織尤其是活動性T淋巴細胞中水平增高，被認為是細胞免疫的標志物。近期一項Meta分析顯示ADA診斷的靈敏度和特異性分別為79%和91%[17]。但是目前認為診斷TBM缺乏特異性，不推薦作為TBM的常規診斷方法[18]，ADA水平升高只能進一步幫助確診TBM。聚合酶鏈反應是檢測腦脊液中結核分枝桿菌的DNA的一種常用方法。腦脊液細菌培養的靈敏度和特異性分別為39%和100%，而是用PCR技術檢測的靈敏度和特異性為75%和100%。腦脊液TB培養陽性的患者靈敏度顯著提高。選擇合適的結核分枝桿菌特異性的DNA以及防止腦脊液標本污染是獲得高特異性的關鍵。腦脊液中找到結核分枝桿菌仍然是診斷的一個巨大的挑戰。一些新型的診斷方法如顯微藥物敏感性實驗（MODS）、ELISA法檢測脂阿拉伯甘露糖抗原正在研究中。
6.2影像學診斷
CT和MRI是TBM的診斷和并發癥的評估常用的影像學檢查方法。腦積水、結核瘤以及腦膜強化是TBM常見的影像學特征[19]。TBM的CT特點包括基底池的強化、滲出物，腦積水以及腦室周圍梗死灶。腦積水及基底池強化是最常見的異常表現。平掃CT上基底池高密度影被認為是敏感性和特異性的表現。脈絡膜從強化以及腦室擴大應高度懷疑TBM。常見的異常表現包括：腦積水，腦膜及基底池強化，腦梗死和局灶性/彌漫性腦水腫，結核瘤。TBM患者腦積水與腦卒中的風險及預后不良存在相關性[20]。MRI比CT檢查敏感性更高。MRI增強檢查可在疾病早期發現腦膜的強化，有報道稱高達39%的TBM患者早期MRI可出現異常表現。在MRI成像中，局部的腦膜強化比彌漫性腦膜強化更常見。此外，胸片或胸部CT發現活動性肺結核尤其是粟粒性肺結核應高度懷疑TBM。
6.3鑒別診斷
各種類型的中樞神經系統感染、血管疾病、炎癥性疾病、腫瘤都需與TBM相鑒別。有時難以同部分細菌性腦膜炎鑒別。TBM有六大特征：病程超過5天，頭痛，腦脊液細胞數＜1000×106/L，顏色淡黃或微混，淋巴細胞比例＞30%，蛋白含量增高＞1g/L[21]。一些炎癥性或自身免疫性疾病（如Wegener肉芽腫、結節病）除了引起腦膜的炎癥外，還會引起其他器官的炎癥。隱球菌性腦膜炎患者中頭痛通常是最主要的有時甚至是唯一的臨床表現。隱腦患者中腦膜刺激征常不明顯，神經影像學檢查往往也是正常的。腦脊液墨汁染色找到隱球菌可確診。弓形蟲感染患者也可以表現為彌漫性的腦膜炎癥。腦脊液中葡萄糖的濃度明顯降低時，應考慮到癌性腦膜炎的可能。約有5%的腫瘤患者出現癌性腦膜炎。原發性彌漫性腦膜膠質瘤是一種罕見情況，即異位細胞巢的神經膠質瘤種植在軟腦膜上產生類似于慢性感染性炎癥的表現。
7結核性腦膜炎和人類免疫缺陷
病毒HIV感染患者TBM的發病率和死亡率明顯增加。一些研究發現，HIV感染并不會改變TBM患者的臨床表現、實驗室檢查結果、影像學表現以及對治療的反應。HIV陽性患者CD4+細胞計數明顯減少。HIV感染會削弱CSF的炎癥反應，大多數HIV患者腦脊液中可無炎性改變[22]。然而，另外一些相反的研究表明，HIV-陰性TBM患者與HIV-陽性TBM患者臨床表現仍存在不同。例如，有研究指出HIV感染患者中胸片提示活動性肺結核的比例更高，而TBM的經典CT成像（梗阻性腦積水和基底池強化）卻不太突出。HIV-陰性患者顱內占位性病變更加常見。已有報道多重耐藥性TBM的感染及腦脊液的非炎癥性改變。早期的研究發現，HIV感染的TBM患者的嗜中性粒細胞增多、腦脊液細菌涂片及培養的陽性率高，對抗結核藥物的耐藥性高。
8多重耐藥性結核性腦膜炎
（MDR-TBM）耐藥性TBM已成為一個日益嚴重的問題，多重耐藥性結核性腦膜炎的死亡率高達100%[23]。2007年，全球大約有50萬例多重耐藥性結核病,2008年約有44萬MDR-TBM患者，其中印度和中國患者約占一半比例。在結核高發病率國家中，MDR-TBM所占比例約為1%-14%甚至更高。HIV患者中結核菌的耐藥性更常見。單純異煙肼耐藥或合并鏈霉素耐藥對患者的生存率無明顯影響，但是合并HIV感染的患者死亡率明顯升高。
9臨床治療及預后
TBM患者應早期開始抗結核治療。抗結核治療往往需要在找到結核桿菌之前的經驗治療。常用的一線抗結核藥物有異煙肼、利福平、吡嗪酰胺、鏈霉素、乙胺丁醇。二線抗結核藥物有乙硫異煙肼、環絲氨酸、對氨基水楊酸、卷曲霉素等。喹諾酮類藥物主要用于耐藥性結核的抗菌治療。大多數一線抗結核藥物（乙胺丁醇除外）都能很好的通過血腦屏障。
9.1抗結核藥物治療方案目前，對TBM的抗結核治療仍沒有一個統一的標準。世界衛生組織推薦以抗結核為基礎的治療。目前對TBM患者推薦至少3個月的強化治療和至少6個月的鞏固治療。強化治療方案包括四種一線抗結核藥物：異煙肼、利福平膠囊、吡嗪酰胺和鏈霉素。TBM患者中抗結核治療的鞏固階段通常延續7-10個月。美國胸科協會指南推薦TBM較長時間（9-12個月）的抗結核治療。HIV陽性患者的抗結核治療與HIV陰性患者治療相同。當患者對合適的抗結核藥物的反應不佳或既往有耐藥性肺結核病史時應考慮到多重耐藥性結核性腦膜炎的可能。有效的指南推薦抗結核方案至少包括五種藥物。治療方案應包括鞘內注射抗結核藥物。在這五種藥物中，必須包含喹諾酮類。治療包括初始的6個月強化治療以及后期12-18個月的鞏固治療。隨著廣泛耐藥性結核病的出現（一種耐多藥結核病至少對異煙肼和利福平，所有氟喹諾酮類，和至少一個的可注射的藥物，如丁胺卡那霉素，卡那霉素，卷曲霉素等產生耐藥），對TBM的治療提出巨大的挑戰。免疫重建炎癥綜合征在合并HIV感染的結核患者中也存在致命性的危險。這一并發癥可能在使用抗逆轉錄病毒治療初期或治療后3個月后出現。免疫重建炎癥綜合征的特點是CD4+細胞計數的減少。同時服用抗結核藥物和抗逆轉錄病毒藥物可能會產生明顯的藥物的相互作用。例如，有利福平誘導的細胞色素P-450、P-糖蛋白導致非核苷類逆轉錄酶抑制劑，尤其是蛋白酶抑制劑的濃度降低。這一效應潛在性削弱了抗逆轉錄病毒藥物的療效。
9.2類固醇激素激素可以明顯降低TBM的死亡率以及減輕存活者的神經功能缺損。有研究證明使用地塞米松可改善TBM的預后，這可能是因為地塞米松能減輕腦水腫以及腦梗死的發生率。皮質類固醇激素在TBM患者中的具體作用機制仍不明確。目前認為TBM患者的高死亡率和致殘率與顱內的炎癥反應嚴重性有關。皮質類固醇激素可能由于減輕腦實質和腦膜的炎癥反應、腦水腫以及顱內壓增高。皮質類固醇激素被認為可以調節巨噬細胞產生細胞因子和趨化因子。Simmons和他的同事證明，皮質類固醇激素治療改善預后并不是因為介導腦脊液中免疫炎癥介質的改變或者通過抑制外周T細胞對對結核分枝桿菌的免疫應答[24]。基質金屬蛋白酶為細胞外基質降解的介質并且與CNS的一些炎癥反應的發病機制有關。最新一項研究證實，地塞米松能夠在治療早期降低腦脊液中金屬蛋白酶-9的濃度。作者認為，這可能是皮質類固醇激素能夠改善TBM預后的機制之一[25]。
9.3預后TBM的早期診斷和治療是提高預后的關鍵。然而，抗結核治療只能使不到50%的患者免于死亡和殘疾。成人皮質類固醇激素的使用與死亡率的下降明顯相關。在疾病早期階段開始使用激素可明顯降低死亡率和致殘率。一些研究認為腦脊液中細胞比例，尤其是白細胞計數減低與死亡率呈正相關。存活患者與腦脊液中淋巴細胞比例減少及中性粒細胞比例升高，這提示中性粒細胞的比例有保護作用。患者年齡＜5歲，＞50歲以及病程超過2個月的患者死亡率最高。兒科的一項研究發現，治療后只有20%患者能夠完全恢復，80%的患者死亡或者殘疾。在大多數研究中，疾病的分期是與死亡率相關的一個關鍵因素。一些研究指出，五大因素與預后相關：疾病的Ⅲ期階段，低血糖水平，CSF/外周血血糖比，CSF蛋白水平，以及影像學檢查異常。在對TBM患者預后的多因素logistic回歸分析發現，種族、疾病的分期、抽搐、運動功能、腦干功能障礙以及腦梗死為TBM預后的獨立危險因素[26]。合并HIV感染的TBM患者死亡率更高。在一項比較研究中，HIV感染患者死亡率為63.3%、而HIV陰性患者死亡率僅為17.5%。
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1.2教育特點
高等職業教育中，衛生職業院校的培養目標是主要是使求學者獲得衛生職業或職業群所需的實際能力(包括技能和知識等)，提供通向醫療衛生職業的道路。因此培養學生的實踐技能操作時培養的重點方向。實踐技能不僅包括醫學相關的實踐技能，還包括對計算機技術的使用和醫學信息計算機技術的熟練使用。而當下大部分衛生類院校沒有開設專門的醫學信息計算機相關課程，學生在進入工作崗位前需要單獨進行相關的崗前醫學信息計算機技能的培訓，才能進入工作崗位。由此可見在醫學院校和衛生職業學院開設醫學信息計算機技術課程已經迫在眉睫。
1.3計算機教學
衛生職業學院的計算機教學現今仍以計算機基礎知識為主要教學內容，一般學時為54學時，主要講授計算機基礎知識、網絡基礎知識、Office辦公自動化等方面內容。在實際的教學過程中發現許多學生在中學時代的計算機課程中已經學會了上述大部分知識，教學存在重復性，同時也無法突出衛生職業學院的特點，和醫學專業的特點。不能實現與醫療衛生服務機構的崗位需求無縫對接。因此在衛生職業學院等衛生類院校開設醫學信息計算機課程，已經成為了目前迫切需要解決的問題
2醫學信息計算機應用技術和醫學信息系統
2.1醫學信息計算機應用技術
醫學信息計算機應用技術是一門以醫學信息為主要探究對象，以醫學信息的運動規律及應用方法為主要探究內容，以現代計算機為主要工具，以解決醫藥工作者在處理醫學信息過程中的各種問題為主要探究目標的一門新興學科，是一門介于醫學、計算機科學與信息學之間的交叉學科，應用性強有不乏自身基礎理論的探究。
2.2醫學信息系統醫學信息系統
涵蓋整個與醫療、衛生有關的信息加工、傳遞、存儲以及利用等相關的信息系統，包括公共衛生信息系統、醫療服務信息系統（主要由醫院信息系統組成），衛生行政管理信息系統所組成。
3教學計劃和實施方案
3.1教材選擇
醫學信息計算機應用技術作為一門新興學科，目前可供選擇的教材較少，推薦使用以下教材：（1）《醫學信息計算機應用技術》，高等教育出版社。該教材也是全國醫學信息技術人才培養工程教材、全國醫學信息技術考試管理中心崗位技能考試的制定教材。（2）《衛生信息學》，衛生出版社。
3.2教師培訓
原有的衛生職業學院的計算機課教師和實驗教師可以參加全國醫學信息技術考試管理中心的培訓，考試后獲得相關的從業資格。同時鼓勵教師到醫院等醫療衛生服務機構進修，參觀、學習，了解醫學信息計算機技術的實際應用，更好地實現教學目標。3.3教學計劃在第一學年即可開設，建議設54學時，其中理論12學時，實踐42學時。同時針對不同專業制定不同的教學計劃。
3.4教學目標及其具體實施方案
衛生職業院校開設的專業較多，以我院為例，開設了護理、口腔醫學技術、醫學檢驗技術、藥學、康復治療技術、醫學營養、公共衛生管理等專業。不同的專業學生學習的專業課程完全不同，日常使用和管理的醫學信息也不盡相同，可以針對專業開設不同的課程。如護理專業學生重點介紹門診護士和住院護士的醫學信息計算機技術的使用。藥學專業學生重點學習藥房（藥局）的計算機管理系統。檢驗專業重點學習醫學、衛生檢驗、檢疫實驗室的醫學信息的管理。根據不同的專業突出不同的側重點，在教學中可以分專業教學，從而達到醫學信息計算機技術的學習目的。下面以護理專業學生為例介紹教學目標及其具體實施方案。護理專業學生可根據學習方向重點學習醫院信息系統的門診護理工作站、住院護理中心和社區衛生服務機構等衛生服務機構的醫學信息管理系統軟件的使用。以住院護理中心的計算機管理中，住院護士應具備以下醫院信息系統的計算機操作能力，如表1，表2所示。
3.5改變教學實施策略，改革教學方式
結合醫學信息管理系統軟件的操作采用以實訓教學為主的教學、考核方式。改革考試方式，采用實踐技能操作的考試方法，模擬醫院的科室設置，安裝醫院信息計算機管理系統，同時設置掛號室、收款室、醫生診室、藥局、門診處置室等部門，由不同專業學生扮演患者、掛號護士、收款人員、門診醫生、藥局藥劑師、門診護士，分組進行操作，完成整個門診操作流程。同時鼓勵參加全國醫學信息計算機應用技術認證考試。使學生畢業時獲得雙證。
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眾所周知，二十世紀醫學成像有了巨大的突破和近戰，現如今，隨著各種醫學成像系統和設備的出現，這些裝置都成了現代醫生進行臨床診斷的重要依據所在。相關資料顯示，很多知名企業像是西門子、飛利浦、GE等大型企業都開始設立了專門的醫學成像設備研發部門，再加上醫療機構的需求，這直接導致了醫學影像專業人才巨大的高端人才缺口所在。筆者要著重指出的現代設備需求的都是應用型的復合人才需要有極強的動手和解決實際問題的基本能力，從這一點我們不難看出，當前社會人才需求的類型和具體要求所在。
三、現階段現代醫學成像技術課程教學中的問題所在
第一，教學內容理論性較強，內容較多，課時量相對較少因而對于某些成像技術和一些基本算法實現的過程講解不深入，甚至一略而過，致使學生學完該課程后對于醫學成像技術這門課的認識和理解仍然停留在比較膚淺的階段，很難有效地實現既定的培養目標。第二，教學方法不夠豐富目前課堂多采用現代的多媒體教學，但是又過分依賴于多媒體，而單純的多媒體教學又會使學生產生偷懶情緒，一晃而過的幻燈片并不會給學生留下深刻的印象，這很大程度上影響了學生學習的興趣和教學的效果。第三，現有的考核體系不夠完善醫學成像技術具有醫理工三結合的特點，融合了當今諸多高新技術，不僅注重基本成像原理的基礎理論知識，更注重對儀器設備的實際動手操作。傳統教學體系，已然不適用于現代醫學教學了。
四、新時期現代醫學成像技術課程教學改革策略分析
（一）關于教學內容的改革
筆者認為要針對當前社會需求在具體選擇合適教材，主要教材是《醫學成像系統》，輔教材可以選擇《醫學影像成像理論》和《醫學成像技術》。同時，筆者將為學生準備自編的講義和其他輔助參考資料。在實際教學過程中，利用一切可利用的多媒體教學手段和現代化教學方法來綜合利用其次，借助現代教育技術，結合多媒體手段來豐富課堂教學的內容。
（二）關于實踐教學的改革與創新
現代教學中實踐性教學，是為了更好的將復雜的額理論榮辱到實際動手當中，主要體現的實踐性的基本特點。高校應當開設必要的相關醫學實驗室，為學生創造更多的實際動手機會和實踐能力的培養，這樣以來，學生在實際操作過程中就會真正了解到自己的缺點并努力進行系統性的改進。
（三）考核體系的改變
傳統的教學考評體系中，仍采取的是筆試考試為主，實踐考試為輔。然而，這種模式并不能真實檢驗學生對知識掌握的具體情況和實際操作能力。筆者在實際考核過程中會逐步加強實踐環節的考試并將這些成績融入到期末考試總評成績當中。
