《生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)指南系列：活細(xì)胞成像(第2版)》包括活細(xì)胞成像的基礎(chǔ)理論、較新發(fā)展和實(shí)驗(yàn)指南。系統(tǒng)介紹了熒光蛋白的各種光譜變體，表達(dá)載體構(gòu)建，活細(xì)胞成像用CCD相機(jī)的類型及工作原理，常用顯微鏡系統(tǒng)(如寬視場、共聚焦和轉(zhuǎn)盤式共聚焦)，以及新一代超分辨率顯微鏡系統(tǒng)，圖像處理方法和軟件，各種定量成像等分析分子動(dòng)力學(xué)的方法。作為實(shí)驗(yàn)指南，《生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)指南系列：活細(xì)胞成像(第2版)》以各種不同細(xì)胞和生物體為對象給出了具體的成像實(shí)例，包括染色質(zhì)、蛋白質(zhì)和RNA的標(biāo)記定位，蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用檢測，金屬離子和pH的生物傳感器，脂類物質(zhì)的標(biāo)記等。
《生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)指南系列：活細(xì)胞成像(第2版)》既可以作為活細(xì)胞成像領(lǐng)域的入門讀物，又可以作為人類、動(dòng)物、植物、昆蟲和微生物等專業(yè)科研人員的理論基礎(chǔ)讀物和具體實(shí)驗(yàn)操作指南。
《生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)指南系列：活細(xì)胞成像(第2版)》不僅是一本活細(xì)胞成像的實(shí)驗(yàn)指南，而且系統(tǒng)地介紹了與活細(xì)胞成像有關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)和理論以及較新發(fā)展。內(nèi)容包括熒光蛋白的各種光譜變體，表達(dá)載體構(gòu)建及其注意事項(xiàng)，活細(xì)胞成像所用的CCD相機(jī)的類型及工作原理，常用顯微鏡系統(tǒng)(如寬視場、共聚焦和轉(zhuǎn)盤式共聚焦)及新一代超分辨顯微鏡系統(tǒng)，圖像處理方法和軟件，各種定量成像等分析分子動(dòng)力學(xué)的方法。同時(shí)，以各種不同細(xì)胞和生物體為對象給出了具體的成像實(shí)例，包括染色質(zhì)、蛋白質(zhì)和RNA的標(biāo)記定位，蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)互作檢測，金屬離子和pH的生物傳感器，脂類物質(zhì)的標(biāo)記等。另外，每章還列出了相關(guān)參考文獻(xiàn)、網(wǎng)站和軟件。
《生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)指南系列：活細(xì)胞成像(第2版)》可以作為活細(xì)胞成像的入門讀物，也可以作為一線科研人員的理論基礎(chǔ)讀物和具體實(shí)驗(yàn)步驟指南。同時(shí)，《生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)指南系列：活細(xì)胞成像(第2版)》還可以作為活細(xì)胞成像課程的教科書。
作者：(美)R. D. 戈德曼，(英)J. R. 斯瓦羅，(美)D. L. 斯佩克特編著；方玉達(dá)等譯
譯者序
前言
各章附加的影像
上篇 活細(xì)胞成像的檢測和方法
第1章 熒光蛋白的跟蹤與檢測
第2章 熒光蛋白融合的構(gòu)建和表達(dá)
第3章 用線性聚丙烯酸阻抗細(xì)胞與基底黏附的微圖案化處理技術(shù)
第4章 CCD相機(jī)在活細(xì)胞熒光成像中的應(yīng)用
第5章 熒光干擾技術(shù)研究活細(xì)胞中蛋白質(zhì)的運(yùn)動(dòng)性和分子動(dòng)態(tài)：FRAP、Photoactivation、Photoconversion和FLIP
第6章 細(xì)胞中蛋白質(zhì)狀態(tài)成像
第7章 用于高分辨率活細(xì)胞成像的多功能多色彩全內(nèi)反射熒光及轉(zhuǎn)盤式共聚焦顯微成像系統(tǒng)
第8章 共聚焦顯微鏡、去卷積和結(jié)構(gòu)照明方法
第9章 生物成像和微觀機(jī)械性質(zhì)測量中的原子力顯微鏡
第10章 OMX，一個(gè)多模式多通道寬場成像的新平臺(tái)
第11章 數(shù)字掃描激光光片熒光顯微鏡
第12章 活體細(xì)胞熒光相關(guān)光譜初步
第13章 動(dòng)態(tài)移動(dòng)細(xì)胞和粒點(diǎn)的跟蹤及定量分析
第14章 測量細(xì)胞材料特性的成像技術(shù)
第15章 細(xì)胞動(dòng)態(tài)的計(jì)算圖像分析——粒點(diǎn)追蹤的案例分析
第16章 顯微成像中的軟件工具、數(shù)據(jù)結(jié)構(gòu)及控制界面
第17章 以哺乳動(dòng)物活細(xì)胞為例介紹高通量顯微鏡
下篇 活細(xì)胞和生物體的成像
第18章 哺乳動(dòng)物細(xì)胞的活體成像
第19章 酵母活細(xì)胞成像
第20章 線蟲的活細(xì)胞成像
第21章 植物活細(xì)胞成像
第22章 果蠅活細(xì)胞成像技術(shù)的拓展
第23章 乳腺癌鼠模型腫瘤基質(zhì)相互作用在轉(zhuǎn)盤式共聚焦顯微鏡下的動(dòng)態(tài)和長時(shí)間活體成像
第24章 活體腫瘤的高分辨多光子成像
第25章 四半胱氨酸標(biāo)簽與雙砷染料標(biāo)記的活細(xì)胞光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡的關(guān)聯(lián)成像
第26章 小鼠正常組織和疾病組織活體成像研究
第27章 活細(xì)胞中脂類的成像
第28章 染色體被乳糖操縱基因標(biāo)記的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的發(fā)展
第29章 活細(xì)胞中基因表達(dá)的成像
第30章 在哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞中研究有絲分裂
第31章 中間纖維蛋白在活細(xì)胞內(nèi)的成像
第32章 表達(dá)和分析綠色熒光蛋白標(biāo)記的微管蛋白和微管相關(guān)蛋白的方法
第33章 膜系統(tǒng)和膜運(yùn)輸?shù)幕罴?xì)胞成像
第34章 機(jī)械應(yīng)力下的活細(xì)胞成像
第35章 基于全內(nèi)反射熒光顯微鏡的單分子成像
第36章 基于全內(nèi)反射熒光顯微技術(shù)的細(xì)胞成像
第37章 活細(xì)胞中單個(gè)RNA分子的觀測與定量分析
附錄 注意事項(xiàng)
索引
上篇活細(xì)胞成像的檢測和方法
第1章熒光蛋白的跟蹤與檢測
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1DepartmentofPhysiology，UniversityofMarylandSchoolofMedicine，Baltimore，Maryland21201；
2DepartmentofBiologicalScience，NationalHighMagneticFieldLaboratory，F(xiàn)loridaStateUniversity，
Tallahassee，F(xiàn)lorida32310；3Departmentof MolecularPhysiologyandBiophysics，VanderbiltUniversity，
Nashville，Tennessee37232
亞馬遜雨林植物種類的多樣性為我們提供了營養(yǎng)豐富的水果和強(qiáng)大的藥用生物堿，
同樣，海洋世界里豐富的水生生物也為生物學(xué)家提供了新的研究材料去探索生命科學(xué)
中一些最古老的未解之謎。在超過15年的時(shí)間里，從海洋生物中獲得的熒光蛋白的不
斷快速改進(jìn)為活細(xì)胞成像技術(shù)帶來了革命性的推進(jìn)作用(Shaneretal.2007；Dayand
Schaufele2008；Stepanenkoetal.2008)。熒光蛋白在生命科學(xué)研究中得到了廣泛的應(yīng)
用，熒光蛋白作為標(biāo)記蛋白被用于標(biāo)記細(xì)胞器并被構(gòu)建成融合蛋白用來監(jiān)測細(xì)胞內(nèi)的
動(dòng)態(tài)變化過程從而顯示細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制，其作為體內(nèi)探針對全身進(jìn)行顯微成像，
也可用于癌癥的檢測(Hoffman2005；Liveretal.2007)。此外，熒光蛋白可以作為高
度特異性的生物傳感器用來監(jiān)測多種細(xì)胞內(nèi)現(xiàn)象，包括pH、金屬離子濃度范圍、蛋白
激酶活性、細(xì)胞凋亡、膜壓、環(huán)核苷酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及跟蹤神經(jīng)細(xì)胞通路等(Lalondeet
al.2005；Lietal.2006；Wangetal.2008)。
綠色熒光蛋白(greenfluorescentprotein，GFP)的發(fā)現(xiàn)要追溯到20世紀(jì)60年代
初，研究人員在研究維多利亞發(fā)光水母(????????????????)的生物發(fā)光特性時(shí)分離出
了一種發(fā)藍(lán)光的、鈣離子依賴的生物發(fā)光蛋白，并將該蛋白命名為水母素(S
生物科學(xué)終要搞清楚活生物體內(nèi)所有細(xì)胞的動(dòng)態(tài)和功能。近年來，熒光蛋白及其各種光譜變體的開發(fā)和熒光顯微鏡及其相關(guān)技術(shù)的發(fā)展為研究活細(xì)胞結(jié)構(gòu)、動(dòng)態(tài)和功能開啟了一扇大門。本書不僅是一本活細(xì)胞成像的實(shí)驗(yàn)指南，而且系統(tǒng)地介紹了與活細(xì)胞成像有關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)和理論以及較新發(fā)展。
——譯者 方玉達(dá)
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儀器發(fā)展到今天，給我們許多的驚奇，成像，給我們許多直觀的認(rèn)識(shí)。
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