實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(簡(jiǎn)稱(chēng)Real-time PCR)具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、定量、速度快、全封閉反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，受到生物學(xué)家們的青睞，促進(jìn)了生命科學(xué)的發(fā)展。該技術(shù)是目前確定樣品中DNA或RNA拷貝數(shù)最敏感、最的方法，還可進(jìn)行多重反應(yīng)，無(wú)污染，自動(dòng)化程度高，在生物學(xué)的所有學(xué)科、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和藥學(xué)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
本書(shū)在介紹實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)原理基礎(chǔ)上，集中論述該技術(shù)在各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用，包括檢測(cè)致病菌、檢測(cè)病毒、檢測(cè)基因突變和臨床、遺傳病研究、腫瘤研究、環(huán)境微生物檢測(cè)、動(dòng)物學(xué)研究、基因表達(dá)檢測(cè)和流行病學(xué)等。在編寫(xiě)時(shí)力求方法盡可能詳細(xì)，對(duì)每一種方法提供了反應(yīng)體系、反應(yīng)條件和結(jié)果分析，還附有參考文獻(xiàn)，但讀者在具體應(yīng)用時(shí)，也不宜照本宣科，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)因事制宜，對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行必要的優(yōu)化。
本書(shū)可供分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等生物學(xué)科，醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)、藥學(xué)等學(xué)科高年級(jí)本科生、研究生以及其他研究人員閱讀參考。
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及時(shí)章實(shí)時(shí)熒光定量PCR概述
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的基本原理
一、引言
二、原理
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
一、Applied Biosystems公司的系列實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
二、iQTM 5實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
三、LightCycler實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
四、SmartCycler System實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
五、Mx3000P實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
六、Rotor?Gene實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR中的熒光化學(xué)物質(zhì)
一、熒光染料
二、水解探針
三、分子信標(biāo)
四、熒光標(biāo)記引物
五、雙探針雜交
六、復(fù)合探針
第四節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的定量方法
一、定量
二、相對(duì)定量
第五節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn)方法
一、以DNA為起始實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)
二、以RNA為起始實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量RT?PCR
第六節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的問(wèn)題
一、擴(kuò)增子的設(shè)計(jì)
二、實(shí)驗(yàn)方案的優(yōu)化
三、實(shí)踐中應(yīng)該注意的問(wèn)題
小結(jié)
本章參考文獻(xiàn)
第二章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在病原菌檢測(cè)中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)沙門(mén)菌的檢測(cè)
一、引言
二、材料
三、方法
四、注意事項(xiàng)
五、應(yīng)用
六、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)在幽門(mén)螺桿菌檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、基本原理
三、試驗(yàn)材料
四、方法
五、注意事項(xiàng)
六、應(yīng)用
七、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)在致病性大腸桿菌檢測(cè)中的應(yīng)用
一、檢測(cè)DNA樣品中fliCH7基因的Real?time PCR方法
二、檢測(cè)RNA樣品中rfbE和eae基因的Real?time PCR方法
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第四節(jié)在肉毒梭菌檢測(cè)中的應(yīng)用
方案一SYBR Green Ⅰ Real?time PCR方法檢測(cè)A型肉毒梭菌
一、引言
二、原理
三、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
四、實(shí)驗(yàn)材料和方法
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、討論
方案二用TaqMan Real?time PCR對(duì)A型、B型和E型肉毒梭菌的檢測(cè)
一、引言
二、原理
三、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
四、實(shí)驗(yàn)材料和方法
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、討論
方案三TaqMan Real?time PCR 在肉毒梭菌C型毒素基因檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、原理
三、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
四、實(shí)驗(yàn)材料和方法
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、討論
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第五節(jié)在嗜水氣單胞菌檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、材料
三、方法
四、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
小結(jié)
第三章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在病毒檢測(cè)中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量RT?PCR在甲型H1N1檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料與試劑
四、試驗(yàn)方法
五、結(jié)果判定
六、注意事項(xiàng)
七、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)登革病毒的實(shí)時(shí)熒光定量RT?PCR檢測(cè)
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料與試劑
四、操作步驟
五、注意事項(xiàng)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)H5N1亞型高致病性禽流感病毒的實(shí)時(shí)熒光定量RT?PCR檢測(cè)
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料與試劑
四、操作步驟
五、試驗(yàn)結(jié)果判定
六、注意事項(xiàng)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第四節(jié)腸道病毒71型的實(shí)時(shí)熒光定量RT?PCR檢測(cè)
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料與試劑
四、操作步驟
五、結(jié)果分析
六、注意事項(xiàng)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第五節(jié)多重實(shí)時(shí)熒光定量PCR在呼吸道病毒檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料與試劑
四、試驗(yàn)原理與方法
五、結(jié)果判定
六、注意事項(xiàng)
七、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第六節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR用于重組桿狀病毒滴度檢測(cè)的研究
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、材料
四、方法
五、結(jié)果及分析
六、注意事項(xiàng)
七、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第七節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在HIV檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、基本原理
三、試驗(yàn)材料
四、方法
五、試驗(yàn)結(jié)果判定
六、注意事項(xiàng)
七、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第八節(jié)在檢測(cè)HBV和HCV方面的應(yīng)用
A? 實(shí)時(shí)熒光定量PCR在檢測(cè)HBV方面的應(yīng)用
一、引言
二、材料和方法
三、小結(jié)
B?實(shí)時(shí)熒光定量PCR在檢測(cè)HCV方面的應(yīng)用
一、引言
二、材料和方法
三、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第四章實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因突變及臨床應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因突變?cè)谶z傳病診斷中的應(yīng)用
一、引言
二、應(yīng)用巢式PCR和TaqMan MGB探針Real?time PCR技術(shù)檢測(cè)經(jīng)典型苯丙酮
尿癥(PKU)
三、應(yīng)用SYBR Green Ⅰ Real?time PCR技術(shù)檢測(cè)慢性骨髓增殖性疾病
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因突變?cè)谀[瘤診斷、治療和預(yù)后中的應(yīng)用
一、引言
二、應(yīng)用ASB?PCR方法檢測(cè)Kras基因突變
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)基因突變?cè)谀退幉≡w監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、通過(guò)雜交探針實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)臨床分離的結(jié)核分枝桿菌的異煙肼抗性
三、FRET實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)幽門(mén)螺桿菌耐克拉霉素相關(guān)的基因點(diǎn)
突變
本章參考文獻(xiàn)
第五章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在遺傳病研究中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR識(shí)別SNP的方法
一、原理
二、常用的突變識(shí)別方法
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在SNP分型中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、試驗(yàn)原理
四、試驗(yàn)材料
五、試驗(yàn)方法
六、結(jié)果與討論
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)等位基因特異性實(shí)時(shí)熒光定量PCR在DNA庫(kù)中等位基因定量檢測(cè)中的
應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、試驗(yàn)原理
四、試驗(yàn)材料
五、實(shí)驗(yàn)方法
六、結(jié)果與討論
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第四節(jié)等位基因特異性PCR結(jié)合分子信標(biāo)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在腫瘤和線(xiàn)粒體疾
病檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、試驗(yàn)原理
四、試驗(yàn)材料
五、試驗(yàn)方法
六、結(jié)果與討論
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第六章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在腫瘤中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在腫瘤早期診斷中的意義
方案1Pescadillo在乳腺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義
一、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、基本原理
三、實(shí)驗(yàn)材料
四、實(shí)驗(yàn)方法
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、小結(jié)
方案2實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)microRNA在不同腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、基本原理
三、材料
四、方法
五、結(jié)果
六、小結(jié)
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在腫瘤預(yù)后評(píng)估中的應(yīng)用
方案1實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)uPA、PAI?1、TIMP?1 mRNA表達(dá)與乳腺癌預(yù)
后的關(guān)系
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、實(shí)驗(yàn)材料
三、實(shí)驗(yàn)方法
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
五、小結(jié)
方案2實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)uPA mRNA表達(dá)在HER2陽(yáng)性乳腺癌預(yù)后中的
意義
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、實(shí)驗(yàn)材料
三、實(shí)驗(yàn)方法
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
五、小結(jié)
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在藥物療效判斷中的作用
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、材料
三、方法
四、結(jié)果
五、小結(jié)
第四節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在基因表達(dá)調(diào)控中的應(yīng)用
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、實(shí)驗(yàn)材料
三、實(shí)驗(yàn)方法
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
五、小結(jié)
本章參考文獻(xiàn)
第七章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在環(huán)境微生物檢測(cè)中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在檢測(cè)土壤微生物中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、原理
四、土壤微生物DNA提取方法匯總
五、操作步驟
六、實(shí)時(shí)熒光定量PCR在土壤中病原菌定量檢測(cè)中的應(yīng)用
七、實(shí)時(shí)熒光定量PCR在土壤中生防菌的動(dòng)態(tài)變化監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR 技術(shù)在空氣微生物檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、試驗(yàn)?zāi)康?/p>
三、試驗(yàn)材料與方法
四、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在檢測(cè)水源微生物方面的應(yīng)用
一、引言
二、基本原理
三、研究進(jìn)展
四、實(shí)驗(yàn)方法
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
六、結(jié)果分析
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第八章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在動(dòng)物學(xué)研究中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在動(dòng)物感染性疾病監(jiān)測(cè)和檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、原理
三、材料
四、方法與步驟
五、注意事項(xiàng)
六、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物檢測(cè)中的應(yīng)用
一、引言
二、原理
三、材料
四、方法與步驟
五、注意事項(xiàng)
六、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在突變動(dòng)物檢測(cè)和突變品系培育中的應(yīng)用
一、引言
二、SYBR Green Ⅰ實(shí)時(shí)熒光定量PCR在HLA?1502基因檢測(cè)中的應(yīng)用
三、實(shí)時(shí)熒光定量PCR在白化突變鼠檢測(cè)中的應(yīng)用
四、注意事項(xiàng)
五、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第四節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在藥物效果評(píng)價(jià)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用
一、引言
二、實(shí)時(shí)熒光定量PCR在馬傳染性貧血病毒疫苗效果評(píng)價(jià)中的應(yīng)用
三、利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR評(píng)價(jià)以離子交換色譜純化抗體時(shí)外源病毒因子的清除效果
四、注意事項(xiàng)
五、應(yīng)用
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第九章實(shí)時(shí)熒光定量PCR在基因表達(dá)檢測(cè)和流行病學(xué)中的應(yīng)用
及時(shí)節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在分析基因差異表達(dá)中的應(yīng)用
一、實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)和優(yōu)化
二、實(shí)時(shí)熒光定量PCR應(yīng)用實(shí)例
三、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
四、小結(jié)
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第二節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)CAR基因在小鼠肺發(fā)育不同階段中的表達(dá)
一、引言
二、材料及方法
三、數(shù)據(jù)分析
本節(jié)參考文獻(xiàn)
第三節(jié)實(shí)時(shí)熒光定量PCR在流行病學(xué)中的應(yīng)用
一、微生物的檢測(cè)和鑒定
二、耐藥分析
三、DNA甲基化、單核苷酸多態(tài)性及突變分析
四、腫瘤基因檢測(cè)
五、基因表達(dá)差異分析
六、微生態(tài)中微生物種的相對(duì)定量
本節(jié)參考文獻(xiàn)
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基礎(chǔ)知識(shí)不錯(cuò)，剩下的就是文獻(xiàn)啦 美中不足 沒(méi)有摸索實(shí)驗(yàn)條件的實(shí)驗(yàn)
