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及時章 分子生物學技術概述 一、引言 二、目的基因的獲取 三、克隆載體的構建和選擇 四、載體的轉化 五、重組子的篩選 六、基因表達 七、生物工程技術的應用 參考文獻第二章 核酸提取技術 及時節 質粒DNA的提取 一、引言 二、堿裂解法小量質粒提取所需的儀器、材料及基本步驟 三、Promega質粒DNA小量提取試劑盒操作程序 四、注意事項 五、實驗結果說明 六、疑難解析 第二節 基因組DNA的提取 一、引言 二、從植物組織提取基因組DNA 三、從動物組織提取基因組DNA 四、細菌基因組DNA的制備 五、用DNA提取試劑盒從全血和組織中提取基因組DNA 六、注意事項 七、實驗結果說明 八、疑難解析 第三節 RNA的提取 一、引言 二、實驗設計思路和基本步驟 三、實驗結果說明 四、疑難解析 參考文獻第三章 目的基因的獲取及鑒定技術 及時節 普通PCR 一、普通PCR的基本概念和原理 二、普通PCR技術的實驗方法 三、疑難解析 第二節 實時熒光定量PCR 一、實時熒光定量PCR的基本概念和原理 二、實時熒光定量PCR的定量方法 三、熒光定量PCR的實驗方法 四、熒光定量PCR技術的應用 五、疑難解析 第三節 環介導恒溫擴增法快速檢測病原菌 一、引言 二、環介導恒溫核酸擴增的原理 三、實驗設計思路和基本步驟 四、實驗結果 五、疑難解析 六、小結 參考文獻第四章 載體的構建和鑒定 及時節 克隆載體 一、pBR322載體 二、pUC8——一種Lac選擇型質粒 三、pGEM3Z——克隆DNA的體外轉錄 四、柯斯質粒載體 第二節 表達載體 一、原核表達載體 二、真核表達載體 第三節 載體構建中的關鍵工具和步驟 一、關鍵工具 二、關鍵步驟 第四節 載體構建的應用舉例 一、實驗材料 二、實驗方法 參考文獻第五章 細菌轉化與細胞轉染技術 及時節 細菌轉化 一、基本原理 二、實驗設計思路和基本步驟 三、實驗結果及分析 四、疑難解析 第二節 細胞轉染 一、基本原理 二、實驗設計和基本步驟 三、實驗結果及分析 四、疑難解析 參考文獻第六章 外源基因表達的鑒定第七章 報告基因分析第八章 差異基因表達譜分析第九章 蛋白質核酸相互作用技術第十章 蛋白質-蛋白質相互作用技術第十一章 微生物體內同源重組技術第十二章 轉基因動物技術第十三章 基因打靶技術第十四章 流式細胞術實驗方法第十五章 干細胞的分離培養與誘導分化第十六章 小RNA的構造及實驗技術第十七章 非編碼RNA數據庫及在線分析工具介紹 及時章 分子生物學技術概述 一、引言 二、目的基因的獲取 三、克隆載體的構建和選擇 四、載體的轉化 五、重組子的篩選 六、基因表達 七、生物工程技術的應用 參考文獻 第二章 核酸提取技術 及時節 質粒DNA的提取 一、引言 二、堿裂解法小量質粒提取所需的儀器、材料及基本步驟 三、Promega質粒DNA小量提取試劑盒操作程序 四、注意事項 五、實驗結果說明 六、疑難解析 第二節 基因組DNA的提取 一、引言 二、從植物組織提取基因組DNA 三、從動物組織提取基因組DNA 四、細菌基因組DNA的制備 五、用DNA提取試劑盒從全血和組織中提取基因組DNA 六、注意事項 七、實驗結果說明 八、疑難解析 第三節 RNA的提取 一、引言 二、實驗設計思路和基本步驟 三、實驗結果說明 四、疑難解析 參考文獻 第三章 目的基因的獲取及鑒定技術 及時節 普通PCR 一、普通PCR的基本概念和原理 二、普通PCR技術的實驗方法 三、疑難解析 第二節 實時熒光定量PCR 一、實時熒光定量PCR的基本概念和原理 二、實時熒光定量PCR的定量方法 三、熒光定量PCR的實驗方法 四、熒光定量PCR技術的應用 五、疑難解析 第三節 環介導恒溫擴增法快速檢測病原菌 一、引言 二、環介導恒溫核酸擴增的原理 三、實驗設計思路和基本步驟 四、實驗結果 五、疑難解析 六、小結 參考文獻 第四章 載體的構建和鑒定 及時節 克隆載體 一、pBR322載體 二、pUC8——一種Lac選擇型質粒 三、pGEM3Z——克隆DNA的體外轉錄 四、柯斯質粒載體 第二節 表達載體 一、原核表達載體 二、真核表達載體 第三節 載體構建中的關鍵工具和步驟 一、關鍵工具 二、關鍵步驟 第四節 載體構建的應用舉例 一、實驗材料 二、實驗方法 參考文獻 第五章 細菌轉化與細胞轉染技術 及時節 細菌轉化 一、基本原理 二、實驗設計思路和基本步驟 三、實驗結果及分析 四、疑難解析 第二節 細胞轉染 一、基本原理 二、實驗設計和基本步驟 三、實驗結果及分析 四、疑難解析 參考文獻 第六章 外源基因表達的鑒定 第七章 報告基因分析 第八章 差異基因表達譜分析 第九章 蛋白質核酸相互作用技術 第十章 蛋白質-蛋白質相互作用技術 第十一章 微生物體內同源重組技術 第十二章 轉基因動物技術 第十三章 基因打靶技術 第十四章 流式細胞術實驗方法 第十五章 干細胞的分離培養與誘導分化 第十六章 小RNA的構造及實驗技術 第十七章 非編碼RNA數據庫及在線分析工具介紹